Hvordan fungerer bakteriel endotoksin -test?
Bakteriel endotoksin -test involverer typisk anvendelse af reagenser, der, når de blandes i en opløsning med en mulig forurening, forårsager en reaktion, der betegner tilstedeværelsen af et endotoksin. Kromogen testning, gelklodetest og turbidimetrisk test er de metoder, som forskere ofte anvender til bakteriel endotoksin -test. Teknikere bruger disse evalueringsmetoder på en række stoffer og objekter, når de kontrollerer for endotoksinforurening. Vand, de råvarer, der bruges til fremstilling af medicin, udstyr og emballage, skal alle bestå endotoksinstandarder.
bakterier, svampe og vira har alle beskyttende udvendige membraner, der består af lipopolysaccharider, også benævnt LPS. Lipiddelen af disse kæder indeholder endotoksiner. Disse stoffer forbliver generelt inden for membranen, men frigives under processen med celledeling og under cellulær ødelæggelse eller lysering. Hos mennesker forårsager disse stoffer feber, unormal koagulation, septisk chok og andre symptomerSelv om de i modsætning til eksotoksiner i cellen, konverterer endotoksiner ikke til en toksoid. Generelt kontrollerer mikrobiologer for tilstedeværelsen af endotoksiner forbundet med forskellige gramnegative bakterier, herunder e. coli .
Gelklodetest eller limulus ameboecyte lysat (LAL) assay, involverer anvendelse af en membranødelæggende kemisk afledt fra amøebocytter udsat for det pågældende objekt eller stof. Mikrobiologer bruger typisk denne metode til bakteriel endotoksin -test i forbindelse med kromogen og turbidimetrisk test til afgørende resultater.
Kromogen bakteriel endotoksin -test bruger en specielt behandlet LAL. Når dette lysat kontakter et endotoksin, producerer reaktionen en bestemt farve. Den endelige testproces inkluderer måling af turbiditet eller uklarhed i opløsningen. Teknikere udsætter den opløsning, der er dannet i gelklodetest for et spektrofotometer, der udsender en lysstråle. Ved at måle tabet af lysintensitet i bjælken, når den passerer gennem opløsningen, kan mikrobiologer bestemme, om der er et endotoksin.
Lab Associates afslutter generelt disse tre bakterielle endotoksinforsøg to eller tre gange for at sikre nøjagtige resultater. Geltesten bruges ikke udelukkende, da dens laveste påvisningsgrænse er 0,03 Ehrlich -enheder pr. Ml (EU/ml). Kromogene og turbidimetriske test detekterer endotoksiner i 0,005 EU/ml -området. Sikkerhedsparametre adskiller sig meget afhængigt af det stof, der testes. Mens sterilt vand, der bruges til injektions- eller kunstvandingsformål, ikke kan indeholde mere end 0,25 EU/ml, kan sterilt vand til inhalationsformål indeholde op til 0,5 EU/ml.