Hvad er trinene i ELISA -proceduren?
ELISA -proceduren begynder i klinikken, hvor en blodprøve bliver taget fra patienten. Der følges derefter et antal trin ved hjælp af ELISA -testsættet i laboratoriet. Testen registrerer tilstedeværelsen af antistoffer eller antigener til en sygdom, såsom HIV, i blodet. Trinene inkluderer tilsætning af forskellige stoffer og vask og resultater måles generelt ved en farveændring.
Det enzymbundne immunosorbentassay (ELISA), der også kaldes enzymet Immunoassay (EIA), bruges som en diagnostisk test. Det er mest kendt som en diagnostisk test for HIV. Testpladen består normalt af 96 små brønde, hvori et specifikt antigen immobiliseres. Hvis antistoffet er til stede i serumprøven, vil det binde til antigenet, hvilket tillader detektion via de forskellige trin i ELISA -proceduren.
Det første trin i ELISA -proceduren er at opnå en prøve fra patienten. Dette gøres af en sygeplejerske under sterile forhold. Blodet er normalt taget fra en venei armen eller hånden. En turnering placeres på armen for at svulme venen og gøre proceduren lettere, og huden rengøres, hvor nålen vil blive indsat. En lille prik kan mærkes, når nålen går ind, og blodet opsamles i et sterilt rør.
Når blodprøven er taget, overføres den til det laboratorium, hvor resten af ELISA -proceduren udføres af en laboratorietekniker. Blodprøven tilsættes først til brøndene på ELISA -pladen. Hvis det specifikke antistof er til stede, binder det sig til antigenet. Pladen vaskes derefter ved hjælp af en buffer til at fjerne ubundne antistoffer.
Et andet antistof, normalt af animalsk oprindelse, der har et enzym, der er fastgjort til det, tilsættes derefter, som vil binde til antistof-antigen-komplekset. Pladen vaskes igen for at fjerne overskydende. Enzymet er farvegenaktivt, når der tilsættes et underlag i slutningen af ELISA-proceduren. Det er thE Måling af graden af farveændring, der giver resultatet.
ELISA -proceduren skal følges omhyggeligt for at undgå falske resultater. I de fleste ELISA -plader er en positiv og negativ kontrol inkluderet for at minimere sådanne falske resultater. Når man tester for HIV, følges et positivt resultat normalt af et sekund, bekræftende, test, ofte af en anden type, såsom en Western blot.