Was ist Laser Capture Mikrodissektion?
Die Laser-Capture-Mikrodissektion (LCM) ist eine Technik, die in biologischen Labors eingesetzt wird und es Technikern ermöglicht, einen bestimmten Bereich oder Typ von Zellen aus einer Probe zu entfernen. Eine dehydratisierte zelluläre Probe wird auf den Tisch eines Mikroskops gelegt, und eine dünne Schicht aus thermoplastischem Material wie Ethylenvinylacetat wird dann auf einen Abschnitt davon gelegt. Wenn ein Laserstrahl auf die ausgewählten Zellen fokussiert wird, schmilzt eine Schicht Membran und verbindet sich mit ihnen, und diese Zellen werden nach dem Entfernen in den Film eingebettet. Das Verfahren wird auch als Laser-Mikrodissektion (LMD) bezeichnet.
Das ursprünglich vom National Cancer Institute entwickelte Laser Capture Microdissection dient zur Untersuchung verschiedener Arten von Tumoren sowie zur Analyse und Identifizierung der Art verschiedener Krebsarten. Es ermöglicht die Untersuchung verschiedener Teile von Tumoren und ihrer Entwicklungsstadien. Die Technik wird auch für eine Vielzahl genetischer Analysen und zur Untersuchung komplexer Gehirn- und Immunzellen eingesetzt. Es kann in Verbindung mit anderen DNA- und Genexpressionsexperimenten verwendet werden.
LCM ist nicht die einzige Art von Mikrodissektionsverfahren. Eine andere Art von Laser-Capture-Mikrodissektionssystem verwendet nur einen Laser, um Zellproben zu trennen. Es besteht kein Kontakt zwischen den Zellen und irgendeinem Material, und die Energie des Lasers selbst bewegt die mikrodissektierten Zellen in ein Probengefäß. Ein anderes System entfernt unerwünschte Zellen mit ultraviolettem Licht, was länger dauert, aber auch keinen Polymerfilm erfordert.
Aufgrund seiner Fähigkeit, reine Zellproben für die molekulare Analyse zu erhalten, wurde die Mikrodissektion durch Lasereinfang durch verschiedene Studien und Änderungen verbessert. Es wurde festgestellt, dass die Verwendung von gefrorenem Gewebe bessere Ergebnisse liefert. Auf Objektträgern wurden Klebstoffe verwendet. Dies macht es jedoch schwierig, bestimmte Gewebeproben zu erfassen, anstatt das Anhaften von Zellen zu unterstützen. Das Vorhandensein von Feuchtigkeit wirkt sich negativ auf das Aufbringen von Zellen auf einen Film aus, weshalb dehydrierte Gewebeschnitte während der Technik bevorzugt werden.
Trotz ihrer Vorteile weist die Laser-Capture-Mikrodissektion einige Nachteile auf. Die Kosten für Mikroskope, Computer und Software können hoch sein. Es kann auch schwierig sein, Proben zu sehen, da kein Objektträger-Deckglas verwendet wird, was bei vielen ähnlichen Techniken ein Problem darstellt. Die Forscher brauchen auch mehr Zeit, um den Prozess durchzuführen, aber die Reinheit der mit LCM erhaltenen Proben überwiegt immer noch die Vorteile anderer Methoden.