Was ist ein Transfektionsreagenz?
Ein Transfektionsreagenz ist ein Träger für DNA, mit dem ein Forscher die DNA in Zellen in Kultur einbringen kann. Eine Reihe von Reagenzientypen sind in Biowissenschaftsunternehmen erhältlich, und Forscher können auch eigene Reagenzien für kundenspezifische Anwendungen entwickeln. Diese Moleküle können auf verschiedene Weise DNA in die Zielzellen transportieren und in ihr Genom einfügen. Der typische Prozess umfasst das Mischen der gewünschten DNA mit dem Reagenz, das Hinzufügen zu Zellen in Kultur, das Inkubieren und anschließendes Screening, um festzustellen, welche Zellen die neue DNA enthalten.
Die DNA-Transfektion ist ein sehr wichtiges Forschungsinstrument. Forscher können genetisches Material einsetzen, um Gene einzuschalten oder zum Schweigen zu bringen, und mithilfe der Transfektion die Leistung von Zellen in Kultur auf eine bestimmte Art und Weise erzwingen. Das Ziel kann eine vorübergehende genetische Expression zum Zweck des Studiums sein. Es kann auch eine permanente Modifikation sein, die es dem Forscher ermöglicht, eine Kolonie von geklonten Zellen zu erzeugen, die alle das gleiche Gen exprimieren. Diese Zellen können in der Forschung verwendet werden und therapeutische Anwendungen haben.
Calciumphosphat ist eines der ältesten Transfektionsreagenzien. Die Forscher verwenden auch Lipid-basierte Materialien, die in der Regel sehr effektiv sind. Sie können auch virale DNA-Vektoren sowie mechanische Methoden wie Mikroinjektion verwenden, bei denen die gewünschte DNA direkt injiziert wird, um das Risiko eines Abbaus des Materials zu verringern. Genpistolen sind ein weiteres beliebtes Werkzeug für die DNA-Transfektion.
Wenn ein Forscher ein Transfektionsreagenz auswählt, gibt es eine Reihe von Überlegungen. Dazu gehört, wie das Reagenz verwendet wird, um welche Art von DNA es sich handelt und welche Effekte der Forscher wünscht. Das Transfektionsreagenz ist nicht immer perfekt zuverlässig, und der Forscher benötigt auch ein gutes Screening-Tool, um die erfolgreich transfizierten Zellen zu finden und zu isolieren. Auf diese Weise können die Forscher Zellen, die das neue genetische Material nicht akzeptiert haben, zusammen mit Zellen, die dies getan haben, verwerfen, es jedoch auf ungewöhnliche Weise exprimieren, was darauf hindeutet, dass möglicherweise ein gewisser Abbau der DNA stattgefunden hat.
DNA-Transfektionsreagenzienlisten sind von Life-Sciences-Unternehmen erhältlich. Die meisten haben eine Tabelle, anhand derer die Forscher anhand des Zelltyps und der Art des genetischen Materials, das sie einfügen möchten, entscheiden können, welches verwendet werden soll. Normalerweise können Forscher Proben anfordern, um ein Reagenz testen zu können, bevor es für die Forschung verwendet wird. Es ist wichtig, die Dokumentation sorgfältig zu lesen, um sicherzustellen, dass die Funktionsweise des Transfektionsreagenz vor der Verwendung vollständig verstanden wurde.