Was ist quantitative Fluoreszenz?
Quantitative Fluoreszenz ist die Ausstellung von Strahlung, die in einer Probe emittiert wird. Mithilfe der Bildgebungstechnologie kann ein Wissenschaftler Informationen über die Probe sammeln und diese verwenden, um mehr über ihre Struktur oder Funktion zu erfahren. Dieser Ansatz wird in der Biologie häufig verwendet, um einzelne Zellen und ganze Organismen zu untersuchen. Sie benötigen Zugang zu einem Labor, das Mikroskopiegeräte und Kameras mit entsprechender Empfindlichkeit enthält. Beispiele für Bilder aus dieser Form der Analyse finden sich in Lehrbüchern und wissenschaftlichen Veröffentlichungen sowie in Diskussionen über die erhaltenen Daten.
Proben, die für die mikroskopische Bildgebung vorbereitet wurden, können mit fluoreszierenden Markierungen wie Proteinen, die an bestimmten Strukturen in der Zelle haften, angefärbt werden. Wenn diese Tags unter den richtigen Bedingungen mit einer Kamera betrachtet werden, leuchten sie auf. Das einfache Beobachten der Beleuchtung kann dem Forscher wichtige Informationen liefern. Beispielsweise könnte ein Immunologe, der nach Spuren eines bestimmten Antikörpers sucht, eine Markierung verwenden, um diesen zu identifizieren. Dies ist ein Beispiel für qualitative Fluoreszenz, bei der die Beleuchtung allgemeine Informationen über die Eigenschaften der Probe liefert.
Bei der Messung der quantitativen Fluoreszenz sammelt der Forscher spezifische, messbare Informationen. Dies könnte Daten über die genaue Intensität des Lichts beinhalten. Eine weitere Behandlung der Probe kann Möglichkeiten für fortschrittliche Bildgebungstechniken wie die Fluoreszenzrückgewinnung nach dem Photobleichen (FRAP) bieten, die Informationen über die Bewegung von Strukturen innerhalb von Proben liefern. Alle diese quantitativen Fluoreszenztechniken bieten neue Einblicke in die Funktionsweise und den Inhalt einer Struktur.
Präzisionsausrüstung ist für diese Art von Arbeit erforderlich. Alle fluoreszierenden Behandlungen, die zu einer Probe hinzugefügt werden, müssen sorgfältig vorbereitet werden, damit sie die gewünschten Strukturen markieren und sonst nichts. Das Gerät muss angemessen empfindlich und kalibriert sein, um zu bestätigen, dass es genaue Informationen aufnimmt. Wenn der Detektor in einer Digitalkamera beispielsweise ausgeschaltet ist, kann es sein, dass er an einigen Stellen der Probe keine Fluoreszenz sammelt oder einen falschen Messwert erzeugt. In beiden Fällen wären die Daten falsch.
In Pathologielabors kann die quantitative Fluoreszenz zur Bewertung einiger Proben verwendet werden. Diese Technik ist auch in der Forschung weit verbreitet. Mit Hilfe von fluoreszierenden Markierungen können einige sehr auffällige Bilder erstellt werden, um Strukturen wie Nerven oder bestimmte Proteine zu trennen. Die Bilder sind nicht nur optisch bemerkenswert, sondern können auch eine Fülle von Informationen für Forscher enthalten, die sie lesen können. Mit fortschrittlichen Computerprogrammen können quantitative Fluoreszenzbilder analysiert werden, um mehr Daten zu extrahieren und aussagekräftige Ergebnisse zu erzielen.