Was ist die totale RNA-Isolierung?
Die totale Ribonukleinsäure (RNA) -Isolierung ist eine Labortechnik, mit der die gesamte zelluläre RNA aus einer Gewebeprobe extrahiert wird. Dies unterscheidet sich von anderen Verarbeitungsmethoden, bei denen bestimmte RNA-Typen selektiv extrahiert werden. Ein Forscher könnte beispielsweise die Messenger-RNA (mRNA) untersuchen und mit einer Probe arbeiten, um genau dieses genetische Material zu extrahieren. Es gibt eine Reihe von Laborprotokollen für die vollständige RNA-Isolierung unter Verwendung einer Vielzahl von Produkten, die von wissenschaftlichen Lieferanten hergestellt wurden.
Das Sammeln der gesamten zellulären RNA aus einer Gewebeprobe kann eine Reihe von Vorteilen haben. Es kann zu reineren und verwendbareren Informationen führen. Die Technik kann es Forschern auch ermöglichen, auf Degradation zu prüfen, die Probleme mit Experimenten verursachen könnte. Wenn die Probe von schlechter Qualität ist, kann der Forscher die RNA erneut extrahieren, um eine sauberere und nützlichere RNA-Sammlung zu erhalten. Dies kann für viele Arten von Forschung von Bedeutung sein, bei denen schlechte RNA zu Beginn Probleme mit den Experimenten auf der ganzen Linie verursacht.
Techniken zur vollständigen RNA-Isolierung können eine Vielzahl chemischer Mittel umfassen. Einige konzentrieren sich auf die Verwendung ungiftiger Chemikalien, um das Risiko einer Beschädigung der Probe zu verringern. Solche Chemikalien begrenzen auch die nachgeschaltete Verschmutzung von RNA und sind für Laborarbeiter sicherer. Die Labors wählen in der Regel eine bestimmte Chemikalie und ein bestimmtes Protokoll aus, die allen Mitarbeitern empfohlen werden, und fügen ihren Handbüchern eine detaillierte Beschreibung des gesamten RNA-Isolierungsverfahrens bei. Dies stellt die Konsistenz bei der RNA-Verarbeitung in der Einrichtung sicher, um stabilere und nützlichere Ergebnisse zu erzielen.
Der Prozess beginnt mit der Vorbereitung einer Gewebeprobe, deren Größe variieren kann, um sie für die Behandlung vorzubereiten, welche chemischen Reagenzien die gesamte RNA abziehen. Techniker ziehen das Laborhandbuch zu Rate, um festzustellen, wie mit der Probe umzugehen ist, und behandeln sie, um die RNA zu isolieren. Sie können Werkzeuge wie Elektrophoreseplatten verwenden, um die Qualität der Probe zu überprüfen und nach Anzeichen eines Abbaus zu suchen, die auf ein Problem mit dem gesamten RNA-Isolierungsprozess hindeuten könnten.
Die Forscher können ihre eigene vollständige RNA-Isolierung durchführen oder diese Aufgabe an einen Laborassistenten, Doktoranden oder einen ähnlichen Laboranten delegieren. Es ist auch möglich, Isolierungen an andere Laboreinrichtungen zu vergeben. Dies kann manchmal erforderlich sein, um die Integrität eines Experiments zu schützen, indem ein Dritter verwendet wird, um überprüfbare und wiederholbare Ergebnisse zu erzielen. In allen wissenschaftlichen Arbeiten, die auf der Forschung mit der isolierten RNA basieren, muss der Forscher die für die Isolierung verwendete Methode diskutieren und wer die Arbeit durchgeführt hat.