¿Qué es un microscopio de fluorescencia?
Un microscopio de fluorescencia es un microscopio que se utiliza para examinar muestras con propiedades luminiscentes, o muestras que se han preparado con sustancias que crean propiedades luminiscentes. En este tipo de microscopía, la muestra en sí es la fuente de luz. Se puede recopilar una gran cantidad de información con el uso de un microscopio de fluorescencia, y estos microscopios también se pueden usar para crear imágenes sorprendentes en las que las estructuras detalladas son claramente visibles.
Estos microscopios aprovechan las propiedades de ciertos compuestos químicos. Cuando la luz de la longitud de onda adecuada, la luz ultravioleta clásica los excita, estos químicos se encenderán. Si la luminiscencia es breve, se conoce como fluorescencia, mientras que un período más prolongado de luminiscencia después de la excitación se llama fosforescencia. En ambos casos, el color de la luminiscencia variará, dependiendo de los productos químicos involucrados, al igual que la duración precisa del período de luminiscencia.
En un microscopio de fluorescencia, la luz de una longitud de onda particular pasa a través de un condensador de microscopio especializado que enfoca la luz en un haz muy estrecho. Cuando la luz incide en la muestra, los compuestos luminiscentes se excitan y comienzan a emitir luz. Con el uso de un espejo dicroico que filtra el haz de luz utilizado para excitar la muestra, un investigador puede ver claramente la luminiscencia y tomar notas sobre sus propiedades, o tomar una fotografía de la muestra en el microscopio para referencia futura.
Debido a que la luz utilizada en un microscopio de fluorescencia a menudo es potencialmente peligrosa para los ojos, generalmente es necesario usar un filtro polarizador en el ocular para que el microscopio no dañe los ojos del usuario. Los filtros polarizadores también se pueden utilizar para la corrección del color o para aumentar el contraste, de modo que la luminiscencia sea más claramente visible. Al igual que con otros microscopios, la claridad de la imagen se puede ajustar enfocando los componentes del microscopio, y el nivel de aumento también se puede aumentar o disminuir según sea necesario.
En algunos casos, un espécimen puede ser naturalmente luminiscente, como en el caso de algunos minerales que fluorescerán o se fosforestrarán a la luz de una longitud de onda particular. Las muestras también se pueden etiquetar con moléculas conocidas como fluoróforos. Estas moléculas pueden apuntar a estructuras específicas dentro de la muestra, creando una imagen fluorescente de estructuras notables cuando la muestra es excitada por la luz en el microscopio.
Un microscopio de fluorescencia puede ser una compra costosa, especialmente en el caso de microscopios de alta calidad. Como regla general, este tipo de microscopía solo está disponible para laboratorios muy bien equipados.