¿Qué es un marcador de peso molecular?
Un marcador de peso molecular es una molécula utilizada para proporcionar una estimación del tamaño de las moléculas sometidas a electroforesis en gel. Esta es una técnica en la que el ADN, el ARN o las proteínas se separan por tamaño, utilizando una corriente eléctrica en un gel. Este término no debe confundirse con marcadores moleculares en genética, áreas en las que el ADN de un organismo difiere del resto de la población y puede identificarse con una sonda de ADN.
Los marcadores de peso molecular de proteínas se usan comúnmente cuando las proteínas se separan por electroforesis en gel. El marcador de peso molecular es un grupo de proteínas de peso molecular conocido, que generalmente proporcionan las compañías de biotecnología en un rango de tamaño particular. Uno elige el rango de tamaño basado en las muestras que se estudian. Los marcadores de peso molecular se cargan juntos y se separan durante la ejecución. Al medir la distancia recorrida por los marcadores y la proteína de interés, se puede determinar el tamaño de la proteína experimental.
Se pueden visualizar diferentes tipos de marcadores de diferentes maneras. Algunos de los marcadores moleculares no están etiquetados y se tiñen en el gel con el resto de las proteínas. No son visibles hasta que se mancha todo el gel. Otros tipos de marcadores moleculares de proteínas vienen teñidos previamente con colores, y cada tipo de proteína es de un color diferente. La separación es visible mientras el gel está funcionando.
Una ventaja de un marcador de peso molecular previamente teñido es para las transferencias Western. Esta es una técnica en la cual las proteínas se transfieren a una membrana y luego se tiñen con anticuerpos para detectar una proteína en particular. Tener marcadores de colores ayuda a determinar si la transferencia de las proteínas se completa antes de que uno continúe con el resto del procedimiento.
Los marcadores de peso molecular se usan comúnmente para analizar el ADN en geles. Con frecuencia, los marcadores moleculares de ADN están hechos del virus bacteriano lambda . Las enzimas de restricción son producidas por bacterias para digerir el ADN de los organismos invasores, y la enzima de restricción HindIII a menudo se usa para degradar el ADN lambda. Produce una serie de fragmentos reproducibles de diferentes tamaños conocidos como escalera de ADN . Al comparar la distancia recorrida por los estándares en una escala logarítmica, se puede determinar el tamaño de los fragmentos de ADN que se analizan.
Este marcador de peso molecular de ADN puede usarse para analizar el tamaño del ADN producido durante el aislamiento de genes y en experimentos de ingeniería genética. También se puede usar durante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), en la que se amplifican pequeñas cantidades de ADN o ARN para producir grandes cantidades de producto. Las técnicas de PCR se asocian comúnmente con las pruebas de paternidad y la ciencia forense, pero también son muy comunes en la investigación médica y biológica básica. Hay marcadores especiales de peso molecular disponibles para productos más pequeños generados a partir de algunos tipos de PCR o pequeñas moléculas de ARN.