¿Qué es un marcador de peso molecular?
Un marcador de peso molecular es una molécula utilizada para proporcionar una estimación del tamaño de las moléculas sometidas a electroforesis en gel. Esta es una técnica en la que el ADN, el ARN o las proteínas se separan por tamaño, utilizando una corriente eléctrica en un gel. Este término no debe confundirse con los marcadores moleculares en la genética, áreas en las que el ADN de un organismo difiere del resto de la población y puede identificarse con una sonda de ADN. El marcador de peso molecular es un grupo de proteínas de peso molecular conocido, que generalmente son proporcionados por compañías de biotecnología en un rango de tamaño particular. Uno elige el rango de tamaño basado en las muestras que se estudian. Los marcadores de peso molecular se cargan y se separan durante la ejecución. Al medir la distancia recorrida por los marcadores y la proteína de interés, se puede determinar el tamaño de la proteína experimental.
Ty diferenteLos PE de marcadores se pueden visualizar en diferentes modales. Algunos de los marcadores moleculares no están etiquetados y se tiñen en el gel con el resto de las proteínas. No son visibles hasta que todo el gel se mancha. Otros tipos de marcadores moleculares de proteínas vienen prefabricados con colores, y cada tipo de proteína es un color diferente. La separación es visible a medida que el gel se está ejecutando.
Una ventaja de un marcador de peso molecular precipitado es para transferencias occidentales. Esta es una técnica en la que las proteínas se transfieren a una membrana y luego se tiñen con anticuerpos para detectar una proteína particular. Tener marcadores de color ayuda a determinar si la transferencia de las proteínas se completa antes de que uno proceda con el resto del procedimiento.
Los marcadores de peso molecular se usan comúnmente para analizar el ADN en geles. Con frecuencia, los marcadores moleculares de ADN están hechos del virus bacteriano lambda . Restricción EnzyLas ME están hechas por bacterias para digerir el ADN de los organismos invasores, y la enzima de restricción hindiii se usa a menudo para degradar el ADN lambda. Produce una serie de fragmentos reproducibles de tamaño diferente conocido como una escalera de ADN . Al comparar la distancia ejecutada por los estándares en una escala logarítmica, se puede determinar el tamaño de los fragmentos de ADN que se analizan.
Este marcador de peso molecular de ADN puede usarse para analizar el tamaño del ADN producido durante el aislamiento de genes y en los experimentos de ingeniería genética. También se puede usar durante la reacción de cadena polimerasa (PCR), en la que se amplifican pequeñas cantidades de ADN o ARN para producir grandes cantidades de producto. Las técnicas de PCR se asocian comúnmente con las pruebas de paternidad y la ciencia forense, pero también son muy comunes en la investigación biológica médica y básica. Los marcadores de peso molecular especiales están disponibles para productos más pequeños generados a partir de algunos tipos de PCR o pequeñas moléculas de ARN.