¿Qué es un reactivo de transfección?
Un reactivo de transfección es un portador de ADN que un investigador puede usar para insertar el ADN en las células en cultivo. Hay varios tipos de reactivos disponibles a través de compañías de ciencias de la vida, y los investigadores también pueden desarrollar los suyos para aplicaciones personalizadas. Estas moléculas pueden funcionar de diferentes maneras para transportar ADN a las células objetivo e insertarlo en su genoma. El proceso típico implica mezclar el ADN deseado con el reactivo, agregarlo a las células en cultivo, incubarlas y luego examinarlas para ver cuáles contienen el nuevo ADN.
La transfección de ADN es una herramienta de investigación muy importante. Los investigadores pueden insertar material genético para activar genes o silenciarlos y pueden usar la transfección para forzar a las células en cultivo a funcionar de una manera particular. El objetivo puede ser la expresión genética transitoria para fines de estudio. También puede ser una modificación permanente que permitirá al investigador crear una colonia de células clonadas que expresan el mismo gen. Estas células pueden usarse en la investigación y pueden tener aplicaciones terapéuticas.
El fosfato de calcio es uno de los reactivos de transfección más antiguos. Los investigadores también usan materiales a base de lípidos, que tienden a ser altamente efectivos. También pueden usar vectores de ADN virales, así como métodos mecánicos como la microinyección, donde el ADN deseado se inyecta directamente para reducir el riesgo de degradar el material. Las pistolas de genes son otra herramienta popular para la transfección de ADN.
Cuando un investigador selecciona un reactivo de transfección, hay una serie de consideraciones. Estos incluyen cómo se utilizará el reactivo, qué tipo de ADN está involucrado y qué tipo de efectos desea el investigador. El reactivo de transfección no siempre es perfectamente confiable, y el investigador también necesita una buena herramienta de detección para encontrar y aislar las células transfectadas con éxito. Esto permitirá a los investigadores descartar células que no aceptaron el nuevo material genético junto con las células que sí lo hicieron, pero lo expresan de una manera inusual que sugiere que puede haberse producido una degradación del ADN.
Las listas de reactivos de transfección de ADN están disponibles en compañías de ciencias de la vida. La mayoría tiene una tabla para ayudar a los investigadores a decidir qué usar, según el tipo de célula y qué tipo de material genético quiere insertar el investigador. Los investigadores generalmente pueden solicitar muestras para permitirles probar un reactivo antes de comprometerse a su uso en la investigación. Es importante leer la documentación detenidamente para asegurarse de que se comprende completamente el funcionamiento del reactivo de transfección antes de su uso.