¿Qué es un conjugado de anticuerpo?
Un conjugado de anticuerpo es una molécula de etiquetado que se puede usar en ensayos de detección de antígeno histológicos o enzimáticos para localizar los anticuerpos unidos. Funciona al estar físicamente adjunto o conjugado al anticuerpo que se usa para etiquetar un antígeno de interés. Un anticuerpo que está etiquetado con un conjugado de anticuerpo es una herramienta que a menudo se usa en la investigación para identificar la ubicación exacta o la cantidad de proteínas o antígenos de interés, contra los cuales se crían el anticuerpo o anticuerpos. Al exponer un antígeno o proteína de interés a un anticuerpo que se planteó contra él, se pueden etiquetar antígenos o proteínas. Mediante el uso de un conjugado de anticuerpo, es decir, un anticuerpo que se ha conjugado con una molécula utilizada o sintetizada específicamente para detectarse fácilmente, los anticuerpos en sus respectivos antígenos se pueden identificar y ensayar y analizard. El tipo más común de conjugado de anticuerpos es una molécula fluorescente, que permite la identificación de antígenos en el tejido bajo un microscopio fluorescente. Otros conjugados incluyen moléculas como la peroxidasa de rábano de caballos, que se usa en conjugación con anticuerpos para el desarrollo posterior con diaminobencidina (DAB).
A menudo, los anticuerpos primarios se elevarán contra antígenos específicos, mientras que los anticuerpos secundarios se conjugarán con moléculas de etiquetado y se elevarán contra el anticuerpo primario. As an example, one might be interested in identifying an antigen called Antigen X. One would then use, for example, an antibody raised in a mouse that reacts and sticks to Antigen X. To be able to find where these primary mouse antibodies have found and bound to these Antigen X molecules, a secondary antibody would then be used — for example, one raised in a goat — that would be tagged with a conjugcomió que hace que este anticuerpo secundario sea detectable en ensayos microscópicos enzimáticos o fluorescentes. Para los ensayos en la localización de antígenos que usan un microscopio electrónico, las partículas de oro a menudo se usan como un conjugado de anticuerpo porque se pueden detectar usando un haz de electrones.
La razón para usar anticuerpos primarios y secundarios, en lugar de usar una conjugación de anticuerpos en la que el anticuerpo primario se conjuga directamente, es la rentabilidad. La conjugación de anticuerpos es costosa en términos de tiempo y reactivos. Especialmente para antígenos poco comunes, la conjugación de anticuerpos en anticuerpos primarios no vale la pena el gasto de producción. Más bien, mediante el uso de la conjugación de anticuerpos en anticuerpos secundarios, se pueden sintetizar grandes cantidades de un anticuerpo conjugado a la vez y usarse en ensayos con una gama de anticuerpos primarios adaptados para localizar muchos antígenos diferentes, lo que hace que el proceso de producción valga la pena y rentable.
.En algunos casos, sin embargo, se etiquetará un anticuerpo primario paraReduzca el ruido en la señal de detección debido a la mayor unión de anticuerpos no específicos que resulta de usar múltiples anticuerpos. Si bien este costoso ensayos altamente sensibles aún requerirá este método. Es posible comprar kits que permitan a un investigador etiquetar los conjugados en su propio anticuerpo de elección, aumentando el costo del reactivo, pero reduciendo los pasos del protocolo y posiblemente aumentando la relación señal/ruido en el ensayo de detección de anticuerpos finales.