¿Qué es un ensayo de cambio de movilidad electroforética?
Un ensayo es una prueba diseñada para separar las piezas originales de una celda en partes que son fáciles de identificar. El ensayo de cambio de movilidad electroforética es un experimento que utiliza electricidad para mover macromoléculas, como las proteínas, a través de una matriz de gel para causar una separación entre las diferentes macromoléculas basadas en el tamaño. Al igual que la batería de un automóvil, los extremos negativos y positivos están en lados opuestos del ensayo de cambio de movilidad electroforética o ensayo de cambio de gel. Esto hace que la electricidad atraiga a las macromoléculas en función de la carga. Cada macromolécula se mueve a una velocidad diferente, ya que las más pequeñas experimentan menos interferencia del gel.
Se requieren varios pasos para configurar un ensayo de cambio de movilidad electroforética. Las macromoléculas que deben separarse deben estar preparadas primero. La mayoría de las macromoléculas se obtienen de las células vivas y requieren procedimientos específicos. Obtener las piezas para separarse a menudo requiere una centrífuga y una reacción química que descompone las células. La centrífugaGirará un vial a alta velocidad y formará un pellet de las macromoléculas necesarias. Esto se disuelve y, a menudo, se agrega un color u otra etiqueta para ayudar a rastrear el ensayo de cambio de gel.
El gel, a veces llamado cama, también debe estar recién hecho de una mezcla precisa de agarosa en polvo y agua que gira rápidamente del líquido al gel. Comúnmente, un ensayo de cambio de movilidad electroforética tendrá varios carriles para ensayos separados, que se utilizan para comparar diferentes mezclas de macromoléculas. Un carril siempre se establece como control y generalmente solo tiene un tipo de macromolécula.
La fuente de alimentación debe seleccionarse con cuidado y no está conectado hasta que todo esté listo. La cantidad de tiempo que está en la potencia determina el cambio de movilidad de las macromoléculas. Es importante separar las piezas lo suficiente para un análisis adecuado. Si la potencia no está correctamente cronometrada, las comparaciones futuras también serán inexactas.La dirección de las macromoléculas se determinará por qué carga poseen naturalmente: la mayoría se mueve hacia el final negativo.
Las pruebas genéticas simples y los análisis de proteínas se realizan comúnmente con un ensayo de cambio de movilidad electroforética. Esto se muestra por diferentes cambios en diferentes carriles. Si se produce una interacción, las macromoléculas se combinan y funcionan más lentamente a través de la matriz en comparación con el carril de control con solo una macromolécula. Los ensayos de cambio de gel se utilizan para eliminar rápidamente o confirmar los resultados genéticos que los métodos complicados podrían tardar más en completarse. También pueden determinar si los anticuerpos, una macromolécula del sistema inmunitario, se adhieren a las proteínas que pueden usarse para combatir bacterias y virus.