¿Qué es el gel de poliacrilamida?
El gel de poliacrilamida es una solución comúnmente utilizada en la electroforesis, el proceso de separar moléculas o partículas de diferentes tamaños pasándolas a través de un gel y aplicando corriente eléctrica. Hay diferentes recetas para el gel de poliacrilamida, pero típicamente contiene acrilamida, agua, un tampón, persulfato de amonio (APS) y tetrametiletilendiamina (TEMED). Este gel funciona como una matriz que separa los compuestos según su carga y tamaño; Cuanta más acrilamida en la solución de gel, la mejor separación de moléculas más pequeñas. Por lo general, este gel se usa para la separación de proteínas y ADN.
En la electroforesis, un campo eléctrico hace que las partículas cargadas se muevan a través de un gel, que funciona como un tamiz para que las partículas de diferentes tamaños se separen. El gel absorberá cualquier calor producido a partir de la corriente eléctrica. El gel de poliacrilamida se usa comúnmente en este procedimiento, pero la agarosa, otro químico que crea un gel similar, también se puede usar.
geles CAn debe hacerse de una concentración variable, con la cantidad de acrilamida que varía de aproximadamente 6% a 15%. Al mezclar el gel, la acrilamida no está holimerizada, lo que significa que permanece como moléculas individuales. La adición de otros productos químicos que promueven la unión, como el TEMED, hace que las moléculas se unan a la formación de cadenas largas, la parte "poli" de la poliacrilamida.
La principal ventaja del gel de poliacrilamida es que el número de enlaces y dureza se puede controlar en función de la cantidad inicial de acrilamida y TEMED agregado. Un factor principal en la concentración de acrilamida es el tamaño de la molécula que se está analizando. Cuanto más pequeños se separan los compuestos, más acrilamida se necesita; Las partículas muy pequeñas se separan utilizando la concentración más alta, 15 por ciento.
La acrilamida funciona controlando la cantidad de fricción en el gel; La dureza del gel determina la cantidad de frictoion. Los compuestos grandes se moverán a través del gel más lentamente, ya que, naturalmente, hay más fricción o resistencia debido a su tamaño. Los compuestos más pequeños se mueven más rápido, ya que hay menos fricción. Para evitar que los compuestos pequeños se muevan del gel, se agrega más acrilamida para crear más fricción.
El gel de poliacrilamida de ADN se usa para separar las cadenas de ADN de diferente longitud. Las piezas de ADN se separarán por tan solo un nucleótido, los compuestos que forman cada hilo. Para saber qué piezas se refieren a los tamaños específicos, un estándar que contiene fragmentos de un tamaño conocido se ejecuta comúnmente junto con muestras. Las piezas de ADN se comparan luego con el estándar, y se determina el tamaño de la cadena.
Se usa un procedimiento similar para determinar el tamaño de las proteínas, con la mayoría de las personas en sangre. La sangre contiene dos tipos principales de proteínas: globulina, una proteína de gran tamaño y albúmina sérica, una proteína muy pequeña y cargada negativamente. La separación usando gel de poliacrilamida es nosotrosed para determinar la cantidad de cada tipo.