¿Qué es el aislamiento total de ARN?
El aislamiento de ácido ribonucleico total (ARN) es una técnica de laboratorio utilizada para extraer todo el ARN celular de una muestra de tejido. Esto difiere de otros métodos de procesamiento que extraen selectivamente ciertos tipos de ARN. Un investigador podría, por ejemplo, querer inspeccionar el ARN mensajero (ARNm) y podría trabajar con una muestra para extraer solo este material genético. Hay varios protocolos de laboratorio disponibles para el aislamiento total de ARN, utilizando una variedad de productos fabricados por proveedores científicos.
Puede haber una serie de ventajas para recolectar todo el ARN celular de una muestra de tejido. Puede producir información más pura y utilizable. La técnica también puede permitir a los investigadores verificar la degradación que podría causar problemas con los experimentos. Si la muestra es de baja calidad, el investigador puede extraer ARN nuevamente para obtener una colección de ARN más limpia y útil. Esto puede ser importante para muchos tipos de investigación, donde el ARN deficiente al principio causa problemas con los experimentos en el futuro.
Las técnicas para el aislamiento total de ARN pueden involucrar una variedad de agentes químicos. Algunos se centran en el uso de productos químicos no tóxicos para reducir el riesgo de daños a la muestra. Tales productos químicos también limitan la contaminación aguas abajo del ARN y son más seguros para los trabajadores de laboratorio. Los laboratorios tienden a seleccionar un producto químico específico y un protocolo para recomendar a todo el personal e incluyen una descripción detallada del procedimiento de aislamiento de ARN total en sus manuales. Esto asegura la consistencia en el procesamiento de ARN en la instalación para producir resultados más estables y útiles.
El proceso comienza con la preparación de una muestra de tejido, que puede variar en tamaño, para prepararla para el tratamiento de los reactivos químicos para extraer el ARN total. Los técnicos consultan el manual de laboratorio para determinar cómo manejar la muestra y tratarla para aislar el ARN. Pueden usar herramientas como placas de electroforesis para verificar la calidad de la muestra, en busca de signos de degradación que puedan indicar un problema con el proceso de aislamiento de ARN total.
Los investigadores pueden realizar su propio aislamiento total de ARN o delegar esta tarea a un asistente de laboratorio, estudiante graduado o trabajador de laboratorio similar. También es posible contratar el aislamiento a otras instalaciones de laboratorio. Esto a veces puede ser necesario para proteger la integridad de un experimento, mediante el uso de un tercero para generar resultados verificables y repetibles. En cualquier artículo científico basado en la investigación con el ARN aislado, el investigador debe analizar el método utilizado para el aislamiento y quién realizó el trabajo.