Qu'est-ce qu'un microscope à fluorescence?
Un microscope à fluorescence est un appareil utilisé pour examiner la quantité et le type de fluorescence émise par un échantillon. Contrairement à un microscope conventionnel, un microscope à fluorescence crée des images lisibles grâce à l'utilisation de l'irradiation et de la filtration, plutôt qu'à la réflexion traditionnelle. Ce type de microscope est un outil essentiel pour la recherche cellulaire et génétique, y compris pour la production d'images tridimensionnelles de microbes.
La fluorescence est un phénomène qui se produit lorsqu'un matériau devient excité ou plus actif par exposition à un rayonnement. Lorsque le matériau commence à se calmer, l'énergie créée par l'excitation est émise sous forme de lumière. Dans certaines substances, la fluorescence est une propriété naturelle, ce qui signifie qu'aucune irradiation externe n'est nécessaire pour provoquer l'émission de lumière. D'autres substances ne sont pas naturellement fluorescentes, mais peuvent le devenir lorsqu'elles sont excitées par la longueur d'onde correcte de la lumière. Un microscope à fluorescence est le principal moyen d'exciter et d'observer de tels matériaux.
Dans un microscope à fluorescence, un échantillon peut être frappé avec une lumière spécialement sélectionnée pour créer une fluorescence. À l'aide d'un filtre, le microscope ne permet d'atteindre que la longueur d'onde choisie, afin de garantir la meilleure réaction. La source de lumière utilisée pour créer la fluorescence peut varier en fonction du type de microscope à fluorescence et de l'échantillon. L'une des sources de lumière les plus couramment utilisées en microscopie à fluorescence est une lampe à vapeur de mercure, qui crée une lumière extrêmement brillante. Un autre type de lumière fréquemment utilisé est la lampe à arc au xénon, qui produit une lumière semblable à la lumière du jour. Dans certaines situations, les lasers, plutôt que les lumières traditionnelles, peuvent être utilisés à la place.
Une fois que l'échantillon a été excité, un deuxième filtre devient nécessaire pour bloquer la longueur d'onde initiale de la lumière. Connu sous le nom de séparateur de faisceau, ce filtre réfléchit la lumière à une longueur d'onde inférieure à celle utilisée pour exciter l'échantillon. Cela signifie que l'image créée dans le microscope ne sera pas contaminée par la source de lumière initiale, car la lumière de longueur d'onde supérieure passera à travers le séparateur de faisceau. Ainsi, l'image finale créée ne reflétera que la lumière fluorescente provenant de l'échantillon lui-même.
Le microscope à fluorescence a de nombreuses applications différentes dans le monde scientifique. Le plus souvent, il est utilisé dans l'étude des cellules et des micro-organismes, car il peut localiser des détails spécifiques dans de minuscules échantillons avec un degré élevé de précision et de clarté. Les chercheurs en médecine et en biologie utilisent fréquemment la microscopie à fluorescence pour étudier l'ADN et l'ARN, en apprendre davantage sur le comportement et les détails structurels des cellules et sur les anticorps pour mieux comprendre la maladie.