Qu'est-ce qu'un standard interne?
Un étalon interne est une quantité connue de produit chimique ajoutée à un échantillon analytique, ce qui permet aux techniciens d'étalonner les instruments de laboratoire. Cela permet également de calculer des quantités de produits chimiques inconnus, car l'instrument indique la quantité de l'étalon connu en tant que référence. Les tests pouvant bénéficier d’un standard interne incluent la chromatographie en phase gazeuse et liquide.
La chromatographie en phase gazeuse fait passer un échantillon vaporisé sur une colonne garnie d’une terre solide et très pure. L'échantillon est déplacé à travers la colonne avec un gaz inerte ou non réactif tel que l'azote ou l'argon. Différentes molécules absorbent sur la colonne puis sont libérées en fonction de leur structure moléculaire. Le gaz transporte ensuite l'échantillon séparé sur une flamme pour créer des ions ou des molécules avec de petites charges électriques. Un détecteur détermine la quantité de chaque ion et trace les résultats sur un graphique.
La chromatographie en phase liquide sépare également les échantillons en différentes molécules, mais utilise un solvant liquide pour déplacer l'échantillon par gravité ou par pression sur un matériau stationnaire. Un matériau de lit de chromatographie peut être une résine, de la terre de diatomée ou même un autre liquide. L'échantillon est chargé en haut et du solvant est ajouté pour pousser l'échantillon à travers le matériau de la colonne.
Des parties de l'échantillon traverseront la colonne à différentes vitesses en fonction de caractéristiques moléculaires ou ioniques. De petits échantillons de liquide, appelés aliquotes, sont prélevés à intervalles réguliers à partir du bas de la colonne. Ces échantillons contiennent les différentes molécules qui se sont séparées dans la colonne et sont analysés pour déterminer leur composition.
Dans les deux types de chromatographie, de nombreuses variables peuvent affecter les résultats. Le débit du gaz vecteur peut varier légèrement ou les colonnes peuvent être à des températures différentes pour différents échantillons. L'ajout d'un étalon interne étalonné fournit un résultat connu pour tout échantillon placé dans l'instrument de test. Si une variable de l'instrument, telle que le débit de gaz, change d'un petit pourcentage, la norme change du même montant.
Une fois que l'instrument a été étalonné en analysant un échantillon avec l'étalon interne, un échantillon chimique inconnu peut être analysé par le même instrument, avec l'étalon inclus. Les résultats montreront la composition chimique de l'inconnu, ainsi que l'étalon interne, tracés sur le graphique créé par l'instrument. Connaissant la quantité d'étalon interne, il est possible de déterminer la quantité relative de produit chimique inconnu, ce qui permettra de calculer la concentration.
Il est important de noter qu’un étalon interne n’est pas utilisé pour réagir chimiquement avec un échantillon. Au contraire, il est utilisé pour comparer des molécules de tout matériau inconnu avec la quantité connue de l'étalon. Cette technique est appelée définition d'une variable, car la norme connue restera toujours la même d'un échantillon à l'autre, quelles que soient les autres conditions susceptibles de changer.