Qu'est-ce que l'analyse du cycle cellulaire?
L'analyse du cycle cellulaire est une technique utilisée dans la recherche biochimique pour identifier et analyser la phase d'une cellule biologique. Au cours de sa vie, une cellule traverse une série de phases cycliques, appelées collectivement le cycle cellulaire. La quantité d'acide désoxyribonucléique (ADN) dans la cellule change en fonction de la phase. Lors de l'analyse du cycle cellulaire, l'ADN de la cellule est coloré avec un colorant fluorescent, ce qui permet aux chercheurs de déterminer la quantité d'ADN présent et l'emplacement de la cellule dans son cycle.
Le cycle cellulaire comprend deux grandes phases: l'interphase et la mitose. L'interphase consiste en une préparation à la division de la cellule, ou mitose, également appelée phase M. La majeure partie du cycle de vie de la cellule est consacrée à la préparation à la mitose, ce qui est bref par comparaison; l'interphase est donc divisée en trois parties: phase G1, phase S et phase G2.
En G1, la cellule est principalement concernée par la croissance. Au cours de la phase S, l'information génétique de la cellule sous forme d'ADN est répliquée en vue de sa division en deux cellules filles. En G2, la cellule se prépare à la division, menant à la phase M. Après la mitose, la cellule retourne à la section d'interphase G1 et le cycle recommence. Les cellules qui pour une raison quelconque cessent de se diviser quittent le cycle et existent de manière inerte dans ce qu'on appelle la phase G0.
La cellule réplique son ADN pendant la phase S, il y a donc deux fois plus d'ADN dans la cellule pendant G2 et M que dans Gl ou Go. Les chercheurs utilisent ces informations dans l'analyse du cycle cellulaire pour déterminer la phase cellulaire. L'analyse du cycle cellulaire peut également révéler des anomalies dans l'ADN cellulaire.
La technique utilisée dans l'analyse du cycle cellulaire est connue sous le nom de cytométrie en flux. Tout d'abord, un colorant fluorescent est introduit dans la cellule qui colore les molécules d'ADN en se liant chimiquement à celles-ci. Les chercheurs utilisent ensuite un instrument appelé cytomètre pour déterminer l'intensité de la fluorescence de la cellule. Une fluorescence plus élevée indique que plus de colorant était capable de se lier, et cela indique qu'il y a plus d'ADN dans la cellule.
En règle générale, l'analyse du cycle cellulaire est utilisée sur un groupement de cellules. Un type de graphique appelé histogramme est généré à partir des données, montrant souvent deux pics distincts: un qui montre la population de cellules dans la phase G1 et un autre - deux fois plus élevé - qui montre ceux dans la phase G2. Le pic de phase G2 est deux fois plus élevé, car les cellules de cette population contiennent deux fois plus d'ADN que celles du pic G1. Les cellules en phase S, qui sont encore en train de répliquer l'ADN, apparaissent sur le graphique à un niveau intermédiaire entre les deux pics.