Qu'est-ce que l'isolement d'ARN total?
L'isolement de l'acide ribonucléique total (ARN) est une technique de laboratoire utilisée pour extraire tout l'ARN cellulaire d'un échantillon de tissu. Cela diffère des autres méthodes de traitement qui extraient sélectivement certains types d’ARN. Par exemple, un chercheur pourrait vouloir inspecter l'ARN messager (ARNm) et pourrait utiliser un échantillon pour extraire uniquement ce matériel génétique. Il existe un certain nombre de protocoles de laboratoire disponibles pour l'isolement total de l'ARN, utilisant une variété de produits fabriqués par des fournisseurs scientifiques.
Il peut y avoir un certain nombre d'avantages à collecter tout l'ARN cellulaire à partir d'un échantillon de tissu. Cela peut donner des informations plus pures et utilisables. La technique peut également permettre aux chercheurs de vérifier la dégradation susceptible de poser des problèmes lors des expériences. Si l'échantillon est de mauvaise qualité, le chercheur peut extraire à nouveau l'ARN pour obtenir une collection d'ARN plus propre et plus utile. Cela peut être important pour de nombreux types de recherche, où un ARN médiocre au début pose des problèmes d'expérimentation ultérieure.
Les techniques d'isolement total d'ARN peuvent impliquer divers agents chimiques. Certains se concentrent sur l'utilisation de produits chimiques non toxiques pour réduire le risque de dommages à l'échantillon. Ces produits chimiques limitent également la pollution en aval de l'ARN et sont plus sûrs pour les travailleurs de laboratoire. Les laboratoires ont tendance à choisir un produit chimique spécifique et un protocole à recommander à tout le personnel et à inclure une description détaillée de la procédure d'isolement de l'ARN total dans leurs manuels. Cela garantit la cohérence du traitement de l'ARN dans l'installation afin de produire des résultats plus stables et utiles.
Le processus commence par la préparation d'un échantillon de tissu, dont la taille peut varier, afin de le préparer au traitement, ainsi que les réactifs chimiques permettant d'extraire l'ARN total. Les techniciens consultent le manuel du laboratoire pour déterminer comment manipuler l'échantillon et le traiter pour isoler l'ARN. Ils peuvent utiliser des outils tels que des plaques d'électrophorèse pour vérifier la qualité de l'échantillon, à la recherche de signes de dégradation pouvant indiquer un problème lié au processus d'isolation totale de l'ARN.
Les chercheurs peuvent effectuer leur propre isolement d'ARN total ou déléguer cette tâche à un assistant de laboratoire, à un étudiant diplômé ou à un employé de laboratoire similaire. Il est également possible de sous-traiter l'isolement à d'autres laboratoires. Cela peut parfois être nécessaire pour protéger l'intégrité d'une expérience en faisant appel à un tiers pour générer des résultats vérifiables et reproductibles. Dans tous les articles scientifiques basés sur la recherche avec l'ARN isolé, le chercheur doit discuter de la méthode utilisée pour l'isolement et des auteurs du travail.