Che cos'è un antibiogramma?
Un test antibiogramma può essere utilizzato per due scopi diversi. Il metodo Kirby-Bauer viene utilizzato per testare la suscettibilità di un ceppo batterico a vari antibiotici. Gli antibiogrammi possono anche determinare la minima concentrazione inibente (MIC) o la più piccola concentrazione di un antibiotico che inibirà la crescita del ceppo batterico, usando il metodo di diluizione.
Il metodo Kirby-Bauer è un antibiogramma utilizzato per determinare il miglior antibiotico da utilizzare contro un particolare ceppo batterico. I test vengono eseguiti in capsule di Petri, che sono piatti poco profondi, rotondi e coperti riempiti con un mezzo di agar o una sostanza gelatinosa infusa con sostanze nutritive per favorire la crescita batterica. Il ceppo batterico da testare si distribuisce uniformemente sulla superficie della piastra. Diversi dischi di carta circolari, ciascuno infuso con un diverso antibiotico, sono uniformemente distanziati sulla superficie della piastra e spinti delicatamente verso il basso nell'agar per entrare in contatto con i batteri. Le piastre possono quindi crescere durante la notte in un'incubatrice.
Dopo l'incubazione durante la notte, un'area circolare priva di crescita batterica circonderà ogni disco di carta. Questa zona è chiamata la zona di inibizione. Il diametro della zona di inibizione per ciascun disco viene misurato e confrontato con un diagramma di controllo per determinare se il ceppo batterico testato è resistente, intermedio o sensibile a ciascuno dei diversi antibiotici. Una vasta zona di inibizione significherebbe che il ceppo batterico è sensibile all'antibiotico sul disco del test.
Il metodo di diluizione è un antibiogramma utilizzato per determinare la concentrazione di antibiotico più efficace da impiegare contro un ceppo di batteri. Inizia coltivando o facendo crescere un nuovo lotto del batterio di prova durante la notte e quindi controllando le nuove colture per la purezza o purificando la coltura. Vengono anche preparati due batteri di controllo o di confronto. La concentrazione del ceppo batterico viene determinata usando uno spettrofotometro e la concentrazione viene regolata in un intervallo appropriato per il metodo di diluizione.
Una diluizione seriale degli antibiotici da testare viene preparata apportando variazioni crescenti e graduali della concentrazione in diversi flaconcini. Una serie di diverse concentrazioni di antibiotici viene inoculata con pari quantità nel ceppo batterico di prova, e l'altra serie viene inoculata con i ceppi batterici di controllo. Tutte le concentrazioni di antibiotici inoculate possono crescere durante la notte in un incubatore o fino a quando non si osserva una crescita batterica visibile in alcune fiale. Il MIC è la concentrazione di antibiotici in cui non si osserva alcuna crescita batterica visibile. Un valore MIC è un modo controllato per valutare il cambiamento della resistenza dei ceppi batterici e stabilisce limiti sulla terapia antibiotica per le infezioni.