Che cos'è l'elettroforesi su gel di DNA?
L'elettroforesi su gel di DNA è un processo utilizzato per separare proteine e acidi nucleici nella biologia molecolare. Il gel è di solito composto da un polimero reticolato e acrilamide che aiutano a separare e analizzare diverse parti di una molecola di DNA. L'elettroforesi su gel di DNA è comunemente usata in medicina legale per determinare la sequenza specifica di DNA per aiutare a trovare il sospettato principale. È anche comunemente usato in genetica e nei campi della biologia molecolare e della biochimica.
Gli acidi nucleici e le proteine portano una carica positiva o negativa. Quando collocato in una camera elettrica con elettroforesi su gel di DNA, ogni carica elettrica si sposterà verso entrambe le estremità della camera. Le molecole cariche elettriche negative si sposteranno verso l'estremità positiva della camera, mentre le molecole cariche elettriche positive si sposteranno verso l'estremità negativa. Il gel separa ciascuna di queste molecole in modo che si diffondano uniformemente durante la lettura. Il gel è composto da fibre lunghe che impediscono alle molecole di muoversi per facilitare l'analisi delle singole molecole.
Il Southern blotting è una tecnica utilizzata nell'elettroforesi su gel di DNA per determinare la presenza o l'assenza di una specifica sequenza nucleotidica in una molecola di DNA. Il Northern blotting è una tecnica diversa utilizzata per identificare l'espressione genica in presenza di RNA o acido ribonucleico. La macchia orientale viene utilizzata per determinare la presenza di lipidi, proteine e carboidrati in una sequenza di DNA. Per rilevare semplicemente le proteine in una sequenza di DNA, la tecnica del western blotting viene utilizzata nella camera di elettroforesi attraverso l'isolamento del gel.
La zimografia è anche un approccio per rilevare determinate funzioni biologiche attraverso l'elettroforesi su gel di DNA. Viene principalmente utilizzato per studiare gli enzimi extracellulari che degradano la matrice, che catalizzano la distruzione della matrice all'esterno della cellula, nonché la membrana basale di una cellula. L'uso del gel di poliacrilammide aiuta a separare gli enzimi, che sono proteine, usando un substrato proteico come gelatina o caseina. Questa tecnica viene utilizzata per misurare la quantità di attività di degradazione che si verifica all'esterno della cellula.
L'elettroforesi su gel di DNA è usata abbastanza spesso in medicina legale. È usato per separare le proteine del sangue e il DNA trovato sulla scena del crimine per determinare le correlazioni con i sospetti disponibili. L'elettroforesi su gel viene anche utilizzata per determinare un'eredità specifica all'interno della genetica, poiché alcuni DNA e proteine sono associati a razze diverse. Viene anche usato per risolvere casi di paternità per determinare la relazione relativa tra individui.