Che cos'è la microdissezione Laser Capture?
La microdissezione di cattura laser (LCM) è una tecnica utilizzata nei laboratori biologici che consente ai tecnici di rimuovere un'area o un tipo di cellule specificati da un campione. Un campione cellulare disidratato viene posto sul palco di un microscopio e un sottile strato di materiale termoplastico, come etilene vinil acetato, viene quindi posizionato su una sezione di esso. Quando un raggio laser è focalizzato sulle celle selezionate, uno strato di membrana si scioglie e si lega a esse, e queste cellule si incorporano nel film una volta rimosso. Il processo è anche noto come microdissezione laser (LMD).
Creata originariamente dal National Cancer Institute, la microdissezione a cattura laser viene utilizzata per studiare vari tipi di tumori e per analizzare e identificare la natura di diversi tipi di tumori. Permette lo studio di diverse parti di tumori e le loro fasi di sviluppo. La tecnica è anche utilizzata per una varietà di tipi di analisi genetiche e per studiare cellule cerebrali e immunologiche complesse. Può essere usato insieme ad altri esperimenti di espressione genica e del DNA.
LCM non è l'unico tipo di procedura di microdissezione. Un altro tipo di sistema di microdissezione di acquisizione laser utilizza solo un laser per separare i campioni di cellule. Non vi è alcun contatto tra le cellule e qualsiasi tipo di materiale e l'energia del laser stesso sposta le cellule microdissezionate in un contenitore campione. Un sistema diverso rimuove le cellule indesiderate con una luce ultravioletta, che richiede più tempo per essere completata ma non richiede l'uso di un film polimerico.
Grazie alla sua capacità di ottenere campioni puri di cellule per l'analisi molecolare, la microdissezione della cattura laser è stata potenziata attraverso vari studi e alterazioni. È stato scoperto che l'uso di tessuti congelati produce risultati migliori. Gli adesivi sono stati utilizzati su vetrini per microscopio, ma invece di aiutare ad attaccare le cellule, questo rende difficile catturare campioni di tessuto specifici. La presenza di umidità ha un effetto negativo sull'introduzione delle cellule su un film, pertanto durante la tecnica sono preferite sezioni di tessuto disidratate.
Nonostante i suoi vantaggi, la microdissezione di acquisizione laser presenta alcuni svantaggi. I costi di microscopi, computer e software possono essere elevati. Può anche essere difficile vedere i campioni perché non viene utilizzato un vetrino per vetrino da microscopio, il che è un problema con molte tecniche simili. I ricercatori hanno anche bisogno di più tempo per eseguire il processo, ma la purezza dei campioni ottenuti con LCM supera ancora i vantaggi di altri metodi.