Che cos'è una macchia da grammo?
Una colorazione di Gram si riferisce a un risultato del test positivo o negativo prodotto quando un lavaggio di iodio viene introdotto in una coltura di batteri per identificarne la specie. Questo test, noto come colorazione di Gram, funziona rilevando la presenza di lipopolisaccaridi (lipoglicani) e peptidoglicani (mureine) contenuti all'interno delle pareti cellulari del campione di batteri. Si dice che i batteri che hanno un alto livello di peptidoglicani siano Gram-positivi. Al contrario, livelli più bassi di peptidoglicani con lipopolisaccaridi indicano che il campione è Gram-negativo.
Innanzitutto, il campione di batteri viene posizionato su un vetrino e riscaldato al punto da renderlo innocuo in termini di contagio per il gestore. Successivamente, il campione di batteri viene trattato con una soluzione di genziana viola-iodio per un massimo di sessanta secondi. Il vetrino viene quindi sciacquato delicatamente sotto acqua pulita e viene applicata la soluzione Gram, che è una miscela di iodio e ioduro di potassio diluito in acqua. Questo passaggio innesca una reazione al composto viola genziana.
Inizialmente, la reazione produce un colore blu scuro. Tuttavia, un successivo risciacquo con alcool etilico porta alla fuoriuscita del colore in alcuni campioni di batteri, ma non in altri. Viene applicata una soluzione colorante finale che utilizza un colore contrastante, generalmente una variazione di rosso. Un campione che accetta questo colore di contrasto apparirà rosa ed è designato come Gram-negativo. Tuttavia, un campione che mantiene il colore blu scuro è Gram-positivo.
A parte gli scopi di identificazione, il significato del test di colorazione di Gram sta nel fatto che i batteri Gram-negativi producono potenti endotossine che possono causare gravi malattie, come il colera e il tifo. Molti batteri Gram-negativi sono anche resistenti agli antibiotici e non è possibile fabbricare vaccini da essi. Inoltre, non tutti i batteri producono un risultato positivo o negativo. In effetti, alcune specie sono considerate Gram indeterminate o Gram variabili. Altre specie non sono completamente interessate dal test semplicemente perché hanno uno strato protettivo simile a cera nelle loro pareti cellulari che le macchie non possono permeare.
Il test di colorazione Gram fu sviluppato alla fine del 1800 dal noto batteriologo danese Hans Christian Gram. Tuttavia, lo scopo originale del test di colorazione di Gram non era affatto quello di distinguere tra diverse specie batteriche. In effetti, il dottor Gram si è limitato a escogitare un modo migliore per rilevare la presenza di batteri nei campioni di espettorato forniti dai pazienti con polmonite. È anche interessante notare che la scoperta del Dr. Gram, sebbene involontaria, avrebbe avuto un grande impatto sullo studio dei batteri resistenti agli antibiotici mezzo secolo dopo.