Cos'è la macchia di Giemsa?
La colorazione di Giemsa è una miscela standardizzata di coloranti che fa risaltare chiaramente diversi tipi di cellule in una macchia di sangue o in una sottile fetta di tessuto. Questa macchia prende il nome dal chimico tedesco Gustav Giemsa, che per primo la sviluppò per il suo lavoro nello studio del parassita che provoca la malaria - Plasmodium . Al fine di garantire che il tecnico che esamina il campione possa ottenere una lettura accurata, i passaggi della procedura di colorazione devono essere standardizzati e la miscela di coloranti. La macchia di Giemsa è chiamata macchia differenziale perché produce colori diversi a seconda di ciò a cui si lega, come il citoplasma o il DNA.
La formula per la colorazione Giemsa è stata modificata nel tempo per migliorare la stabilità dei coloranti e dei colori che ne risultano. Le attuali miscele standard includono blu di metilene, eosina e talvolta azzurrato B. Questi coloranti sono spesso conservati in una polvere secca e mescolati con acqua appena prima di essere utilizzati. Se è presente acqua nella miscela di colorante prima dell'uso, alcuni dei composti si ossidano e si colorano in modo errato.
Le fasi esatte della procedura per l'uso della colorazione di Giemsa possono variare a seconda dell'organismo o del tipo di cellula per cui il campione viene esaminato e della composizione del campione stesso. Un campione che verrà colorato con la colorazione Giemsa viene solitamente spalmato o applicato su una diapositiva molto presto dopo la sua raccolta. Uno striscio di sangue sottile viene generalmente fissato immergendolo nel metanolo, mentre uno striscio di sangue denso viene semplicemente lasciato asciugare completamente a temperatura ambiente. Il vetrino viene quindi immerso nella macchia per un determinato periodo di tempo e quindi risciacquato con acqua che ha un pH neutro. Le diapositive possono asciugare all'aria prima della visione.
A causa della colorazione differenziale prodotta dalla colorazione di Giemsa, il citoplasma di Plasmodium si colora di azzurro mentre il DNA appare rosso o viola. Un altro parassita, Giardia lamblia, è colorato di rosa-viola ad eccezione del DNA, che si colora di un blu molto scuro. L'istoplasma capsulatum, un fungo, si trova nella sua forma di lievito nei globuli bianchi umani e nelle macchie blu scuro.
Questo processo di colorazione è utile anche negli studi cromosomici e nella visualizzazione delle differenze tra le varie cellule del sangue. Un cromosoma si colora di blu molto scuro in alcune sezioni e blu chiaro in altre. Ciò provoca un effetto banding che aiuta i genetisti a trovare luoghi in cui i cromosomi hanno subito cambiamenti insoliti. I globuli rossi si colorano di rosa, mentre i granuli nei mastociti si presentano come macchiette viola. I globuli bianchi macchiano varie tonalità di blu, permettendo ai diversi tipi - basofili, eosinofili, neutrofili e altri - di distinguersi l'uno dall'altro.