Cos'è l'isolamento totale di RNA?
L'isolamento dell'acido ribonucleico totale (RNA) è una tecnica di laboratorio utilizzata per estrarre tutto l'RNA cellulare da un campione di tessuto. Ciò differisce da altri metodi di elaborazione che estraggono selettivamente alcuni tipi di RNA. Un ricercatore potrebbe, ad esempio, voler ispezionare l'RNA messaggero (mRNA) e potrebbe lavorare con un campione per estrarre solo questo materiale genetico. Esistono numerosi protocolli di laboratorio disponibili per l'isolamento totale dell'RNA, utilizzando una varietà di prodotti realizzati da fornitori scientifici.
Ci possono essere numerosi vantaggi nel raccogliere tutto l'RNA cellulare da un campione di tessuto. Può produrre informazioni più pure e utilizzabili. La tecnica può anche consentire ai ricercatori di verificare la degradazione che potrebbe causare problemi con gli esperimenti. Se il campione è di scarsa qualità, il ricercatore può estrarre di nuovo l'RNA per ottenere una raccolta più pulita e utile di RNA. Questo può essere importante per molti tipi di ricerca, in cui il scarso RNA all'inizio causa problemi con esperimenti in corso.
Le tecniche per l'isolamento totale dell'RNA possono coinvolgere una varietà di agenti chimici. Alcuni si concentrano sull'uso di sostanze chimiche non tossiche per ridurre il rischio di danni al campione. Tali sostanze chimiche limitano anche l'inquinamento a valle dell'RNA e sono più sicure per i lavoratori di laboratorio. I laboratori tendono a selezionare una specifica sostanza chimica e un protocollo da raccomandare a tutto il personale e includere una descrizione dettagliata della procedura di isolamento dell'RNA totale nei loro manuali. Ciò garantisce la coerenza nell'elaborazione dell'RNA presso la struttura per ottenere risultati più stabili e utili.
Il processo inizia con la preparazione di un campione di tessuto, che può variare di dimensioni, per renderlo pronto per il trattamento quali reagenti chimici estraggono l'RNA totale. I tecnici consultano il manuale di laboratorio per determinare come gestire il campione e trattarlo per isolare l'RNA. Possono utilizzare strumenti come piastre di elettroforesi per verificare la qualità del campione, cercando segni di degrado che potrebbero indicare un problema con il processo di isolamento dell'RNA totale.
I ricercatori possono condurre il proprio isolamento totale di RNA o delegare questa attività a un assistente di laboratorio, a uno studente laureato oa un lavoratore di laboratorio simile. È anche possibile contrarre l'isolamento verso altre strutture di laboratorio. Questo a volte può essere necessario per proteggere l'integrità di un esperimento, utilizzando una terza parte per generare risultati verificabili e ripetibili. In tutti gli articoli scientifici basati sulla ricerca con l'RNA isolato, il ricercatore deve discutere il metodo utilizzato per l'isolamento e chi ha eseguito il lavoro.