ELISA 탐지 란 무엇입니까?

효소 연결 면역 흡착제 분석 (ELISA)은 면역학 실험실에서 생물학적 샘플에서 단백질 수준을 결정하기 위해 수행 된 시험이다. ELISA 검출은 명확한 용액 또는 기질이 결합 된 효소-표지 된 항체를 함유하는 플라스틱 플레이트에 첨가되는 시험의 최종 단계를 지칭한다. 효소는 기질을 절단하고 색 변화가 발생합니다. 그런 다음 최종 컬러 솔루션의 광 흡광도는 ELISA 플레이트 리더 또는 분광 광도계에서 측정됩니다.

다양한 유형의 ELISA 테스트가 있으며, 가장 흔한 두 가지는 간접적 인 ELISA와 Capture 또는 샌드위치 인 ELISA입니다. 간접 ELISA는 환자의 혈청에서 항체로 알려진 단백질을 검출하는 데 사용됩니다. 간접 ELISA 검사의 예는 HIV에 대한 항체를 검출하는 데 사용되는 인간 면역 결핍 바이러스 (HIV) 시험입니다. 샌드위치 ELISA 테스트는 단백질 또는 항원을 두 항체 사이에 포착하여 검출합니다. 호르몬 인간 융모 성 생식선 자극 호르핀 (HCG)의 검출, 즉 E임신 중에 부과, 샌드위치 ELISA 테스트로 이루어집니다.

두 시험 모두 분석 끝에 ELISA 검출 단계가 있습니다. 이 단계는 효소 분자가 부착 된 항체의 첨가를 포함한다. 효소-표지 된 항체를 첨가 한 후, 그 효소에 특이적인 기질 분자를 함유하는 무색 용액이 첨가된다. 효소는 기질 분자를 절단하고 용액은 사용 된 조합에 따라 색상을 변화시킨다. 환자 샘플에서 항체 또는 항원의 양을 결정하는 것은 색 변화의 강도를 측정하여 수행됩니다.

ELISA 검출 단계에서 사용할 수있는 몇 가지 효소 기질 조합이 있습니다. 가장 흔한 효소는 양 고추 냉이 퍼 옥시 다제 (HRP)이며, 이는 기질 분자 오르토-페닐 렌 디아민 디 하이드로 클로라이드 (OPD) 및 테트라 메틸 벤지딘 (TMB)을 절단 할 수 있습니다. 두 OPD의 절단TMB는 노란색을 초래하고, 이들 기판의 빛의 광학 밀도 또는 흡광도는 ELISA 플레이트 리더에 의해 측정된다. OPD의 광 흡광도는 490 나노 미터 (NM)의 파장에서 측정되는 반면 TMB는 450 nm에서 측정됩니다.

ELISA 검출 단계에 사용 된 또 다른 일반적인 효소는 알칼리성 포스파타제입니다. 이 효소는 기질 P- 니트로 페닐 포스페이트 (PNPP)와 함께 사용되며, 또한 노란색 용액을 생성한다. PNPP는 405 nm의 파장에서 빛을 흡수합니다.

효소 기질 조합의

선택은 일반적으로 광 흡광도를 측정하는 데 사용되는 장비뿐만 아니라 어떤 효소-표지 된 항체가 상업적으로 이용 가능한지에 기초합니다. ELISA 탐지에 사용할 수있는 많은 조합은 ELISA 테스트를 매우 다양하게 만듭니다. 질병 테스트 및 연구 실험실에서 중요한 도구입니다.