ELISA 프로토콜이란 무엇입니까?

효소 결합 면역 흡착 분석 (ELISA)은 항원 또는 항체를 검출하기 위해 면역학에 사용되는 일반적인 테스트입니다. 항원은 면역 체계 반응을 유발합니다. 즉, 질병을 유발합니다. ELISA는 인간 면역 결핍 바이러스 (HIV), 말라리아, 콜레라, 홍역 및 유행성 이하선염을 포함한 많은 박테리아 및 바이러스 항원을 탐지하는 데 사용됩니다. 약간 다른 ELISA 프로토콜 을 사용하여 이들 및 다른 많은 병원체에 대한 항체를 검출 할 수 있습니다. ELISA 프로토콜은 특정 ELISA를 수행하기위한 단계별 절차입니다.

ELISA 프로토콜은 수행되는 ELISA 유형에 따라 약간 씩 다르지만 기본 개념은 모두 동일합니다. ELISA는 항 글로불린 이라고도하는 효소 연결 항체에 의존합니다. 이들 항 글로불린에 부착 된 신호 분자는 원하는 항원 또는 항체가 존재하는 경우 분석 동안 첨가 된 기질이 색을 변화 시키게한다. 존재하는 항원 또는 항체의 양은 색 변화의 양에 비례하며, 이는 전자 플레이트 리더로 측정 될 수있다.

ELISA에는 세 가지 주요 유형이 있습니다. 직접 ELISA는 일반적으로 항체가 아닌 항원을 탐지하는 데 사용됩니다. 효소 연결 항체가 원하는 항원에 직접 결합하기 때문에 이것이 가장 간단한 ELISA 프로토콜입니다. 이어서, 존재하는 항원의 양을 결정하기 위해 기질을 첨가한다.

간접 ELISA는 항체를 탐지하는 데 사용되는 반면 샌드위치 ELISA라고하는 다른 유형의 간접 ELISA는 항원을 탐지하는 데 사용될 수 있습니다. 샌드위치 ELISA 프로토콜은 원하는 항원에 결합하기 위해 포획 및 검출 항체 라 불리는 2 개의 항체를 필요로한다. 검출 항체에 결합하는 안티 글로불린이 첨가되고, 기질이 첨가된다. 간접 ELISA는 유사한 프로토콜을 따르지만, 원하는 항체를 검출하기 위해 포획 항체보다는 포획 항원을 사용한다.

경쟁 ELISA는 매우 민감한 분석법이기 때문에 저농도로 존재하는 항원을 탐지하는 데 종종 사용됩니다. 다른 ELISA 프로토콜과 달리 경쟁 ELISA는 항체 대신 효소 연결 항원과 약간 다른 정량 방법을 사용합니다. 여기에서, 검출 될 항원 및 효소-결합 항원을 함유하는 샘플이 항체에 첨가되고, 2 개의 항원이 항체-결합 부위와 경쟁한다. 기질이 첨가 될 때, 결합 된 효소-결합 된 항원 대 결합 된 샘플 항원의 비율이 높을수록 색 변화가 더 크다. 이것은 더 낮은 농도의 샘플 항원에서 더 높은 색 변화가 감지됨을 의미하며,이 방법은 매우 민감합니다.