폴리 아크릴 아미드 겔이란?
폴리 아크릴 아미드 겔은 전기 영동에 일반적으로 사용되는 용액으로, 상이한 크기의 분자 또는 입자를 겔에 통과시키고 전류를인가함으로써 분리하는 과정이다. 폴리 아크릴 아미드 겔에는 다른 제조법이 있지만 일반적으로 아크릴 아미드, 물, 완충제,과 황산 암모늄 (APS) 및 테트라 메틸 에틸렌 디아민 (TEMED)을 함유합니다. 이 겔은 전하와 크기에 따라 화합물을 분리하는 매트릭스 역할을합니다. 겔 용액에 아크릴 아미드가 많을수록 작은 분자를 더 잘 분리 할 수 있습니다. 일반적으로이 젤은 단백질과 DNA 분리에 사용됩니다.
전기 영동에서, 전기장은 대전 된 입자가 겔을 통해 이동하게하며, 이는 체와 같은 기능을하여 상이한 크기의 입자가 분리되게한다. 젤은 전류에서 발생하는 열을 흡수합니다. 폴리 아크릴 아미드 겔이 이들 절차에서 일반적으로 사용되지만, 유사한 겔을 생성하는 다른 화학 물질 인 아가 로스도 사용될 수있다.
겔은 약 6 % 내지 15 % 범위의 아크릴 아미드 양으로 다양한 농도로 제조 될 수있다. 겔을 혼합 할 때, 아크릴 아미드는 중합되지 않아 단일 분자로 남아 있음을 의미합니다. TEMED와 같은 결합을 촉진하는 다른 화학 물질을 첨가하면 분자가 서로 연결되어 폴리 아크릴 아미드의 "폴리"부분 인 장쇄를 형성합니다.
폴리 아크릴 아미드 겔의 주요 이점은 초기 결합 량의 아크릴 아미드 및 첨가 된 TEMED에 기초하여 결합 결합 및 경도의 수를 제어 할 수 있다는 것이다. 아크릴 아미드 농도의 주요 요인은 분석되는 분자의 크기입니다. 분리되는 화합물이 작을수록 더 많은 아크릴 아미드가 필요합니다. 매우 작은 입자는 최고 농도 인 15 %를 사용하여 분리됩니다.
아크릴 아미드는 젤의 마찰 량을 조절하여 작동합니다. 겔의 경도는 마찰 량을 결정합니다. 크기가 크면 마찰이나 저항이 자연스럽게 커지므로 큰 화합물은 겔을 통해 천천히 움직입니다. 마찰이 적어 작은 화합물이 더 빨리 움직입니다. 작은 화합물이 겔에서 빠져 나가는 것을 방지하기 위해 더 많은 아크릴 아미드가 첨가되어 더 많은 마찰이 발생합니다.
DNA 폴리 아크릴 아미드 겔은 길이가 다른 DNA 가닥을 분리하는 데 사용됩니다. DNA 조각은 각 가닥을 구성하는 화합물 인 뉴클레오티드 하나만큼만 분리됩니다. 어떤 크기가 특정 크기를 나타내는 지 알기 위해 알려진 크기의 조각을 포함하는 표준이 일반적으로 샘플과 함께 실행됩니다. 그런 다음 DNA 조각을 표준과 비교하고 가닥의 크기를 결정합니다.
유사한 절차를 사용하여 단백질의 크기, 가장 흔히 혈액의 크기를 결정합니다. 혈액에는 크게 단백질 인 글로불린과 매우 작고 음전하 단백질 인 혈청 알부민이 있습니다. 폴리 아크릴 아미드 겔을 이용한 분리는 각 유형의 양을 결정하는데 사용된다.