Wat zijn fosfo-antilichamen?
Eiwitfosforylering is de toevoeging van een fosfaatgroep (PO4) aan een specifiek eiwit, meestal op een serine-, threonine- of tyrosinerest. Over het algemeen is eiwitfosforylering een van de belangrijkste manieren waarop signaaltransductie en enzymatische activiteiten in cellen worden gereguleerd. Antilichamen die deze gefosforyleerde eiwitplaatsen detecteren, worden fosfo-antilichamen genoemd. Het vermogen om het gefosforyleerde residu van een eiwit op een specifieke locatie te detecteren, is een waardevol hulpmiddel voor het detecteren van de activiteit van celsignaleringsroutes en is een sleutel tot het begrijpen van veel cellulaire signaalprocessen.
De toevoeging van de fosfaatgroep aan een serine-, threonine- of tyrosineresidu kan resulteren in eiwitactivatie of inactivatie door een conformationele verandering in het eiwit te induceren, of door de interacties van het eiwit met andere eiwitten of moleculen te beïnvloeden. Fosforylering speelt een belangrijke rol in veel belangrijke cellulaire signaalprocessen, waaronder celgroei en -sterfte, paden die tumorigenese induceren of remmen, hormonale signaalprocessen en energieproductie. Eiwitten worden gefosforyleerd door enzymen die kinasen worden genoemd en gedefosforyleerd door enzymen die fosfatasen worden genoemd. Het proces van omkeerbare fosforylering maakt het daarom mogelijk dat een cel strikte controle uitoefent over deze belangrijke signaalroutes.
Antilichamen zijn Y-vormige moleculen die antigeenbindingsplaatsen bevatten aan het einde van elke Y-arm. In het algemeen herkennen antilichamen unieke sequenties in hun overeenkomstige antigenen, die epitopen worden genoemd. Productie van antilichamen vindt van nature plaats als onderdeel van de immuunrespons wanneer een gastheer wordt blootgesteld aan een vreemd lichaam, waardoor het antilichaam deze vreemde antigenen specifiek kan herkennen en neutraliseren. Dit natuurlijke proces kan worden gebruikt voor onderzoeksdoeleinden door antilichamen te genereren die specifiek een interessant antigeen of eiwit zullen detecteren. Bij het genereren van onderzoeksantilichamen zijn de gastheersoorten vaak konijnen, muizen, schapen of geiten, maar onderzoekers kunnen ook immuuncellen in kweek gebruiken om antilichamen tegen het gewenste antigeen te genereren.
Fosfo-antilichamen kunnen worden gebruikt in onderzoek of in klinische toepassingen. In klinische omgevingen kan de detectie van een bepaald gefosforyleerd eiwit door een fosfo-antilichaam in een tumormonster helpen om de tumorkwaliteit te beoordelen of zelfs om de uitkomst van de ziekte te voorspellen. In onderzoeksomgevingen worden fosfo-antilichamen vaak gebruikt om de activering van celsignaleringsroutes te bestuderen in reactie op een specifieke stimulus.
Veel productiebedrijven van antilichamen zijn beschikbaar om fosfo-antilichamen te leveren aan onderzoekers en clinici. Onderzoekers kunnen deze antilichamen selecteren uit een antilichaamcatalogus, die vaak reagentia bevat voor honderden verschillende gefosforyleerde eiwitten. Bovendien bieden verschillende leveranciers van antilichamen de productie van aangepaste antilichamen voor zelden bestudeerde gefosforyleerde eiwitten waarvoor geen commercieel fosfo-antilichaam beschikbaar is.