Wat is een kloonvector?
Een kloneringsvector is een DNA-segment dat kan worden gebruikt als een drager voor vreemd DNA, zodat vreemd DNA in cellen kan worden geïntroduceerd. Nadat de kloneringsvector aan een cel is toegevoegd, kan het vreemde DNA zichzelf beginnen te repliceren, waardoor talloze kopieën van het vreemde DNA worden geproduceerd die voor een aantal doeleinden kunnen worden gebruikt. Verschillende labs verkopen commercieel generieke kloneringsvectoren die voor onderzoek kunnen worden gebruikt, en mensen kunnen ook hun eigen knutselwerk maken voor specifieke projecten.
Een aantal organismen kan worden gebruikt als bronnen voor kloneringsvectoren. Sommige zijn synthetisch aangemaakt, zoals in het geval van kunstmatige chromosomen van gist en kunstmatige chromosomen van bacteriën, terwijl andere worden genomen uit bacteriën en bacteriofagen. In alle gevallen moet de vector genetisch worden gemodificeerd om het vreemde DNA op te nemen door een insertieplaats te creëren waar het nieuwe DNA past.
Een kloneringsvector moet een invoegplaats hebben die ideaal geschikt is voor veel verschillende strengen vreemd DNA, waardoor onderzoekers de vector voor verschillende projecten kunnen gebruiken. Het heeft ook een DNA-sequentie nodig waarmee het zichzelf kan vermeerderen zodra het in de doelcel wordt ingebracht, en het heeft een marker nodig die onderzoekers kunnen gebruiken om het vreemde DNA te vinden zodra de kloneringsvector begint te propageren. Antibioticaresistentie wordt klassiek gekozen als een marker, zodat cellen kunnen worden geïntroduceerd in een antibioticum dat cellen zal doden zonder het vreemde DNA, waardoor de klonen achterblijven.
Vectoren voor klonen kunnen op veel gebieden van wetenschappelijk onderzoek worden gebruikt. Ze kunnen worden gebruikt om een DNA-streng te dupliceren voor onderzoek en verder onderzoek, zoals wordt gedaan wanneer mensen DNA testen in een forensisch laboratorium of wanneer mensen op zoek zijn naar defecte genen die mogelijk verantwoordelijk zijn voor genetische aandoeningen. Kloneringsvectoren worden ook gebruikt in genetische manipulatie, omdat ze mensen in staat stellen DNA te manipuleren en talloze kopieën van het veranderde DNA te maken.
Werken met kloneringsvectoren vereist een laboratorium met apparatuur waarmee mensen DNA kunnen manipuleren. Het gebruik van een voorraadkloneringsvector uit een laboratorium kan de hoeveelheid tijd verminderen die nodig is om een vector te ontwikkelen, maar onderzoekers moeten nog steeds in staat zijn om de streng vreemd DNA die ze willen invoegen te selecteren en met behulp van de hulp in de kloonvector te integreren. van restrictie-enzymen die de DNA-strengen in de vector scheiden om de insertie of "ligatie" van het nieuwe DNA mogelijk te maken.