Wat is een interne standaard?
Een interne standaard is een bekende hoeveelheid chemische stof die aan een analytisch monster wordt toegevoegd, waardoor technici laboratoriuminstrumenten kunnen kalibreren. Dit maakt ook de berekening van hoeveelheden onbekende chemicaliën mogelijk, omdat het instrument de hoeveelheid van de bekende standaard als referentie zal tonen. Tests die kunnen profiteren van een interne standaard zijn gas- en vloeistofchromatografie.
Gaschromatografie laat een verdampt monster door een kolom gepakt met een vaste, zeer zuivere vorm van grond. Het monster wordt door de kolom bewogen met een inert of niet-reactief gas zoals stikstof of argon. Verschillende moleculen absorberen op de kolom en worden vervolgens vrijgegeven op basis van hun moleculaire structuur. Het gas vervoert vervolgens het gescheiden monster naar een vlam om ionen of moleculen met kleine elektrische ladingen te creëren. Een detector bepaalt de hoeveelheid van elk ion en zet de resultaten in een grafiek.
Vloeistofchromatografie scheidt monsters ook in verschillende moleculen, maar gebruikt een vloeibaar oplosmiddel om het monster door zwaartekracht of druk over een stationair materiaal te verplaatsen. Een chromatografiebedmateriaal kan een hars, diatomeeënaarde of zelfs een andere vloeistof zijn. Het monster wordt bovenaan geladen en oplosmiddel wordt toegevoegd om het monster door het kolommateriaal naar beneden te duwen.
Delen van het monster passeren de kolom met verschillende snelheden op basis van moleculaire of ionische eigenschappen. Kleine monsters vloeistof, aliquots genoemd, worden met regelmatige tussenpozen genomen vanaf de onderkant van de kolom. Deze monsters bevatten de verschillende moleculen die zich in de kolom hebben gescheiden en worden geanalyseerd om hun samenstelling te bepalen.
In beide typen chromatografie kunnen veel variabelen de resultaten beïnvloeden. De stroomsnelheid van het dragergas kan enigszins veranderen, of kolommen kunnen op verschillende temperaturen zijn voor verschillende monsters. Het toevoegen van een gekalibreerde interne standaard levert een bekend resultaat op voor elk monster dat in het testinstrument wordt geplaatst. Als een variabele in het instrument, zoals het gasdebiet, met een klein percentage verandert, verandert de standaard met dezelfde hoeveelheid.
Nadat het instrument is gekalibreerd door een monster met de interne standaard te laten draaien, kan een onbekend chemisch monster door hetzelfde instrument worden geleid, inclusief de standaard. De resultaten tonen de chemische samenstelling van het onbekende, plus de interne standaard, uitgezet in de grafiek die door het instrument is gemaakt. Als u de hoeveelheid interne standaard kent, kan de relatieve hoeveelheid onbekende chemische stof worden bepaald, waardoor de concentratie kan worden berekend.
Het is belangrijk op te merken dat een interne standaard niet wordt gebruikt om chemisch te reageren met een monster. Het wordt eerder gebruikt om moleculen van elk onbekend materiaal te vergelijken met de bekende hoeveelheid van de standaard. Deze techniek staat bekend als het instellen van één variabele, omdat de bekende standaard altijd hetzelfde blijft van sample tot sample, ongeacht andere omstandigheden die kunnen veranderen.