Wat loopt Chromosoom?
Chromosoomwandeling is een methode voor positioneel klonen die wordt gebruikt om een bepaald allel in een genenbibliotheek te vinden, te isoleren en te klonen. Een allel is een gen voor een bepaald genetisch kenmerk dat wordt doorgegeven van volwassenen aan hun nakomelingen, zoals het allel voor bruine ogen in een gen voor oogkleur. Soms is de geschatte locatie van een enkel allel in een reeks deoxyribonucleïnezuur (DNA) bekend. Om een bepaald allel voor een genetisch overdraagbare ziekte te isoleren, moet chromosoomwandelen mogelijk naar het gewenste monster in een niet-toegewezen DNA-sequentie buiten eerder in kaart gebrachte sequenties zoeken.
Om een bepaald ziektegen te lokaliseren, begint het lopen bij het dichtstbijzijnde gen dat al is geïdentificeerd, bekend als een markergen. Elk opeenvolgend gen in de reeks wordt herhaaldelijk getest op zogenaamde overlappingsbeperkingen en in kaart gebracht op hun precieze locatie in de reeks. Uiteindelijk bereikt het lopen door de genen het mutante gen in een niet-toegewezen sequentie die bindt aan een fragment van een gen van die specifieke ziekte. Zodra het gen is gekloond, kan de functie volledig worden geïdentificeerd. Gedurende dit proces worden tests uitgevoerd om de eigenschappen van elke opeenvolgende kloon volledig te identificeren, om hun locaties in kaart te brengen voor toekomstig gebruik.
Er zijn bijna een half dozijn positionele kloneringstests die voorafgaand aan een chromosoomwandeling worden gedaan, om de specifieke genetische sequenties die het gewenste mutante gen voor een ziekte kunnen bevatten, zoveel mogelijk te beperken. Zodra de markers aan weerszijden van een niet-toegewezen waarschijnlijke reeks zijn gevonden, kan de chromosoomwandeling beginnen bij een van de markers. Het testen op elke opeenvolgende kloon is complex, tijdrovend en gevarieerd per soort. Er zijn verschillende tests voor genen gerelateerd aan plantenziekten dan voor genen die betrokken zijn bij een menselijke genenbibliotheek.
Positioneel klonen maakt gebruik van genetische markers waarvan bekend is dat ze de chromosomen bewonen van individuen met specifieke ziekten. Deze databases met bekende gemeenschappelijke kenmerken maken testen mogelijk die kunnen worden gebruikt om individuen te identificeren die al dan niet bepaalde recessieve genen hebben voor een ziekte die nog niet is gepresenteerd. Chromosoomwandeling vereist, samen met alle andere tests die voorafgaand aan chromosoomwandeling zijn uitgevoerd, uitzonderlijk goed uitgeruste laboratoria waarbinnen alle kloneringsfasen, onderzoeken en analyse van gevonden mutaties kunnen worden uitgevoerd.