Wat is recombinante eiwitexpressie?
Recombinante eiwitexpressie is de productie van een eiwit afgeleid van recombinant DNA. Het is een veel voorkomende techniek in de moleculaire biologie en bij de farmaceutische productie van hormoonvervangingen. Het recombinante DNA is een specifiek deel van een gen dat is ontworpen om een enkel product in een gastheercel tot expressie te brengen, geleid door speciale chemische factoren, zodat het rechter -eiwit in grote hoeveelheden tot expressie wordt gebracht. Veel hormonen en enzymen die historisch waren afgeleid van dierbronnen worden nu gesynthetiseerd door recombinante eiwitexpressie, vervolgens geoogst en verfijnd uit gastheercellen.
Om recombinante eiwitten tot expressie te brengen, moeten zorgvuldig geselecteerde sequenties van DNA worden geïntroduceerd in het genoom van een gastheer. Het nemen van delen van de genetische code uit het ene organisme en het plaatsen van deze in de celkernen van het andere is een vorm van klonen. Dit wordt gedaan via het inbrengen van een sequentie van recombinant DNA dat codeert voor het gewenste eiwit in de kern, die expressie van het gen initieert door het in RN te transcriberenA. Recombinante eiwitten worden geassembleerd wanneer stukken mRNA informatie van het DNA -migreren naar de ribosomen van de kern van de cel, en daar initiëren de productie van een eiwit volgens een specifiek sjabloon.
Hostcellen zullen onvoldoende hoeveelheden van een recombinant eiwit maken, tenzij het DNA wordt geïntroduceerd met geschikte vectoren zodat de juiste genetische informatie in voldoende hoeveelheid tot expressie wordt gebracht. Eiwitexpressiefactoren zijn de moleculaire signalen die gepaard moeten gaan met recombinant DNA wanneer het in de gastheercellen wordt ingebracht om ervoor te zorgen dat het doeleiwit tot overexpressie zal worden gebracht. Dit is de enige manier waarop recombinante eiwitexpressie voldoende van een stof kan maken voor farmaceutisch of laboratoriumgebruik.
Ribosomaal eiwitassemblage voltooit het eiwitexpressieproces niet omdat tijdens het oogsten van de inhoud van de bacterie- of gistcellen wordt gemengd met de END -product. Expresseerde recombinante eiwitten moeten worden gezuiverd door scheiding van de stukken vernietigde celdelen. Soms labelt een moleculaire tag het eiwit zodat het kan binden aan een metalen of andere stof en geïsoleerd uit het afval kan worden geïsoleerd. Verschillende technieken bestaan, afhankelijk van factoren zoals eiwitgrootte en de complexiteit van de gastheercel.
Menselijke recombinante eiwitexpressie heeft uitgebreide commerciële en medische toepassingen. Veel hormonen, antilichamen en enzymen werden eerder geëxtraheerd uit dierlijk of kadaverweefsel, maar worden nu synthetisch geproduceerd met behulp van recombinante DNA -technologie. Twee bijzonder belangrijke voorbeelden zijn menselijke groeihormoon en insuline. Veel hormoonvervangingstherapieën vertrouwen op synthetische eiwitten, evenals verschillende testen die worden gebruikt door moleculaire en cellulaire biologen in hun laboratoria. In veel gevallen worden bacteriën gebruikt als gastheercellen voor eenvoudige producten, terwijl complexere recombinante eiwitexpressie, vooral van genen van dieren, in schimmels kan worden gedaanen gisten.