Wat is de Giemsa-vlek?
Giemsakleuring is een gestandaardiseerd mengsel van kleurstoffen waardoor verschillende celtypen duidelijk opvallen in een bloeduitstrijkje of dunne plak weefsel. Deze vlek is vernoemd naar de Duitse scheikundige, Gustav Giemsa, die hem voor het eerst ontwikkelde voor zijn onderzoek naar de parasiet die malaria veroorzaakt - Plasmodium . Om ervoor te zorgen dat de technicus die het monster onderzoekt, een nauwkeurige meting kan verkrijgen, moeten de stappen van de kleuringsprocedure en het mengsel van kleurstoffen worden gestandaardiseerd. Giemsa-vlek wordt een differentiële vlek genoemd omdat deze verschillende kleuren produceert, afhankelijk van waar het aan bindt, zoals cytoplasma of DNA.
De formule voor Giemsa-kleuring is in de loop van de tijd aangepast om de stabiliteit van de kleurstoffen en de kleuren die het resultaat zijn te verbeteren. De huidige standaardmengsels omvatten methyleenblauw, eosine en soms azuurblauw B. Deze kleurstoffen worden vaak opgeslagen in een droge poedervorm en gemengd met water vlak voordat ze worden gebruikt. Als er water in het kleurstofmengsel aanwezig is voordat het wordt gebruikt, zullen sommige van de verbindingen oxideren en onjuist kleuren.
De exacte stappen van de procedure voor het gebruik van Giemsa-kleuring kunnen variëren, afhankelijk van het organisme of celtype waarvoor het monster wordt onderzocht, evenals de samenstelling van het monster zelf. Een monster dat zal worden gekleurd met behulp van de Giemsa-vlek wordt meestal ingesmeerd op of bevestigd op een objectglaasje zeer snel nadat het is verzameld. Een dun bloeduitstrijkje wordt in het algemeen gefixeerd door in methanol te worden gedompeld, terwijl een dik bloeduitstrijkje eenvoudig volledig bij kamertemperatuur kan drogen. Het glaasje wordt vervolgens gedurende een ingestelde tijd in de vlek geweekt en vervolgens gespoeld met water met een neutrale pH. Dia's mogen aan de lucht drogen voordat ze worden bekeken.
Vanwege de differentiële kleuring geproduceerd door Giemsa-kleuring, kleurt Plasmodium cytoplasma lichtblauw terwijl het DNA rood of paars lijkt. Een andere parasiet, Giardia lamblia, is roze-paars gekleurd behalve het DNA, dat erg donkerblauw kleurt. Histoplasma capsulatum, een schimmel, wordt in zijn gistvorm aangetroffen in menselijke witte bloedcellen en kleurt donkerblauw.
Dit kleurproces is ook nuttig in chromosoomonderzoek en bij het visualiseren van de verschillen tussen verschillende bloedcellen. Een chromosoom kleurt in sommige delen heel donkerblauw en in andere delen lichtblauw. Dit veroorzaakt een banding-effect dat genetici helpt plaatsen te vinden waar de chromosomen ongebruikelijke veranderingen hebben ondergaan. Rode bloedcellen kleuren roze, terwijl de korrels in mestcellen verschijnen als paarse vlekken. Witte bloedcellen kleuren verschillende tinten blauw, waardoor de verschillende typen - basofielen, eosinofielen, neutrofielen en anderen - van elkaar kunnen worden onderscheiden.