Wat is de Western Blot?

Een western blot is een laboratoriumanalysetechniek die wordt gebruikt om eiwitten te isoleren. Het kan worden gebruikt bij de diagnose van bepaalde ziekten en ook bij onderzoek naar verschillende eiwitten en processen. Beroemd is dat de westerse vlek verband houdt met de diagnose van HIV-infectie, maar het kan ook worden gebruikt om te zoeken naar sporen van boviene spongiforme encefalitis (BSE) en de ziekte van Lyme. Monsters die worden verzonden voor testen met een Western-blot-protocol kunnen binnen enkele dagen tot enkele weken resultaten opleveren, afhankelijk van de laboratoriumcapaciteit en de urgentie.

In een western-blot wordt het monster, dat uit bloed of weefsel kan zijn, eerst onderworpen aan elektroforese, zodat de eiwitten zich over de lengte zullen scheiden. Een strip van de elektroforese-gel met geïsoleerde eiwitten van de beoogde lengte kan worden gebruikt om de eiwitten over te dragen naar een nitrocellulosesubstraat voor de volgende fase van de test. Tijdens deze fase wordt een antilichaam in het monster geïntroduceerd, met als doel de eiwitten te taggen met antigenen waaraan dat antilichaam zich vasthecht.

Nadat de eiwitten zijn getagd, kunnen ze gemakkelijk worden geïdentificeerd. In het geval van testen op ziekte, geeft de aanwezigheid van een reactief eiwit aan dat het monster positief heeft getest. Westerse blots geven zelden valse positieven terug, hoewel dit soms kan gebeuren, en ze kunnen ook valse negatieven retourneren, waarbij een persoon daadwerkelijk een ziekte heeft, maar dit wordt niet weergegeven bij western blot-testen. Dit kan vooral voorkomen in gevallen waarin het ziekteverwekkende middel nog niet is begonnen met repliceren.

Onderzoekers kunnen de resultaten gebruiken om specifieke eiwitten te identificeren die ze volgen, en voor verschillende andere doeleinden. Inzicht in de werking van het Western blot-protocol is een belangrijke vaardigheid voor sommige onderzoekers en laboratoriumtechnici, omdat ze met deze methode betrouwbare en betrouwbare resultaten moeten kunnen retourneren. Labvaardigheden, waaronder leren omgaan met ingewikkelde of slechte monsters en hoe besmetting tijdens het proces kan worden voorkomen, zodat bekend is dat de resultaten van de test waar zijn.

Deze techniek staat soms bekend als een immunoblot, omdat in wezen de gewenste eiwitten worden "geblot" met antilichamen zodat ze zullen verschijnen. Deze test kan worden gebruikt om te zoeken naar eiwitten in alle dieren, niet alleen mensen, waarbij dierenartsen vaak de western blot-test gebruiken om te bepalen of een kudde koeien is geïnfecteerd of blootgesteld aan BSE.