Hva er trinnene i ELISA -prosedyren?

ELISA -prosedyren begynner på klinikken, med en blodprøve som blir tatt fra pasienten. En rekke trinn følges deretter ved bruk av ELISA -testsettet i laboratoriet. Testen vil oppdage tilstedeværelsen av antistoffer eller antigener mot en sykdom, for eksempel HIV, i blodet. Trinnene inkluderer tilsetning av forskjellige stoffer og vasking, og resultatene måles generelt ved en fargeendring.

Enzymbundet immunosorbentanalyse (ELISA), som også blir referert til som enzymimmunoanalen (EIA), blir brukt som en diagnostisk test. Det er mest kjent som en diagnostisk test for HIV. Testplaten består vanligvis av 96 små brønner som et spesifikt antigen er immobilisert i. Hvis antistoffet er til stede i serumprøven, vil det binde seg til antigenet, og tillater deteksjon via de forskjellige trinnene i ELISA -prosedyren.

Det første trinnet i ELISA -prosedyren er å få en prøve fra pasienten. Dette gjøres av en sykepleier, under sterile forhold. Blodet er vanligvis hentet fra en blodårei armen eller hånden. En turnering er plassert på armen for å svelle venen og gjøre prosedyren enklere og huden rengjøres der nålen vil bli satt inn. En liten stikk kan merkes når nålen går inn og blodet blir samlet i et sterilt rør.

Etter at blodprøven er tatt, overføres den til laboratoriet der resten av ELISA -prosedyren vil bli utført av en laboratorietekniker. Blodprøven tilsettes først til brønnene på ELISA -platen. Hvis det spesifikke antistoffet er til stede, binder det seg til antigenet. Platen vaskes deretter ved bruk av en buffer for å fjerne ubundne antistoffer.

Et andre antistoff, normalt av animalsk opprinnelse, som har et enzym som er festet til det, blir deretter tilsatt, som vil binde seg til antistoff-antigenkomplekset. Platen vaskes igjen for å fjerne overflødig. Enzymet er fargestyrende når et underlag tilsettes ved slutten av ELISA-prosedyren. Det er the måling av graden av fargeendring som gir resultatet.

ELISA -prosedyren må følges nøye for å unngå falske resultater. I de fleste ELISA -plater er en positiv og negativ kontroll inkludert, for å minimere slike falske resultater. Når du tester for HIV, vil et positivt resultat vanligvis bli fulgt opp av et sekund, bekreftende test, ofte av en annen type, for eksempel en Western blot.