Hva er et serum ELISA?

Serumenzymbundet immunosorbentanalyse (serum ELISA) er en metode som brukes for å bestemme mengden av et biologisk stoff i en serumprøve ved å stole på den spesifikke interaksjonen mellom et antigen og et antistoff. Eksempler på biologiske stoffer av interesse inkluderer et antistoff produsert som respons på en virusinfeksjon, for eksempel et antistoff mot humant immunsviktvirus (HIV), eller mot et hormon som indikerer graviditet, for eksempel humant korionisk gonadotropin (hCG), eller mot en autoimmun antistoff produsert ved revmatoid artritt, for eksempel revmatoid faktor. Generelt er det en direkte analyse, som bruker et spesifikt antistoff for å påvise tilstedeværelsen av antigen i en serumprøve, og en indirekte analyse, som bruker et antigen for å bestemme tilstedeværelsen av antistoffer i en serumprøve.

I direkte serum ELISA er en prøve som inneholder en ukjent mengde antigen festet til en ubevegelig overflate, så som et reaksjonsrør eller en mikrotiterplate, og inkubert med et spesifikt antistoff som er kjemisk koblet til et enzym. Motsatt, i det indirekte serum ELISA, er et kjent antigen festet til en ubevegelig overflate og deretter inkubert med serumprøven som inneholder en ukjent mengde antistoff. Det antigenspesifikke antistoffet i serumprøven forventes å binde tett til det immobiliserte antigenet, mens ikke-spesifikke antistoffer fjernes i de følgende vasketrinn. Generelt behandles den ubevegelige overflaten med et andre antistoff som gjenkjenner den uoverensstemmende regionen til alle antistoffer, og som er kjemisk knyttet til et enzym. I både direkte og indirekte ELISA består det siste trinnet av tilsetning av et enzymspesifikt substrat, igangsetting av en reaksjon som gir et målbart signal som er direkte proporsjonal med mengden antigen eller antistoff som er tilstede i serumprøven.

Serum ELISA er en mye brukt test av flere årsaker. Det viktigste er at det anses som en pålitelig klinisk test på grunn av spesifisiteten til antigen-antistoff-interaksjonen, og sensitiviteten til denne analysen tillater påvisning av biologiske stoffer ved ekstremt lave konsentrasjoner i serum. Den er designet for vurdering av et stort antall prøver samtidig, og blir derfor ofte brukt i storskala operasjoner, for eksempel screening av blodgiverprøver for tilstedeværelse av HIV-antistoffer. I tillegg er ELISA-sett som måler ofte analyserte antistoffer og antigener kommersielt tilgjengelige for bruk i kliniske eller forskningsinnstillinger, og inneholder hensiktsmessig alle nødvendige reagenser for å utføre et fullstendig eksperiment.

Et voksende studieområde involverer anvendelse av serum ELISA-teknologi innen området cytokin-deteksjon. Cytokiner er oppløselige proteinmolekyler som skilles ut av immunsystemet som ofte er involvert i inflammatoriske prosesser; cytokinnivåer er derfor informative angående sykdomstilstander assosiert med kronisk betennelse, så som hjertesykdommer, autoimmune sykdommer og fordøyelsessykdommer. Det antas at vurdering av cytokinnivåer kan være i stand til å skille mellom inflammatoriske tarmsykdommer, for eksempel Crohns sykdom og ulcerøs kolitt, og etter hvert kan være i stand til å forutsi utfall i hjertesykdommer og revmatoid artritt.