Hva er laseropptaksmikrodisseksjon?
Laser capture microdissection (LCM) er en teknikk som brukes i biologiske laboratorier som gjør det mulig for teknikere å fjerne et spesifisert område eller type celler fra en prøve. En dehydrert cellulær prøve blir plassert på et mikroskoptrinn, og et tynt lag termoplastisk materiale, så som etylenvinylacetat, blir deretter plassert på et utsnitt av det. Når en laserstråle er fokusert på de valgte cellene, smelter et membranlag og bindes med dem, og disse cellene blir innebygd i filmen når den først er fjernet. Prosessen er også kjent som laser mikrodisseksjon (LMD).
Opprinnelig opprettet av National Cancer Institute, er laser fange mikrodisseksjon brukt til å studere forskjellige typer svulster og for å analysere og identifisere arten av forskjellige typer kreft. Det muliggjør studier av forskjellige deler av svulster og deres utviklingsstadier. Teknikken brukes også til en rekke genetiske analyser og for å studere komplekse hjerne- og immunologiske celler. Det kan brukes i forbindelse med andre DNA- og genekspresjonseksperimenter.
LCM er ikke den eneste typen mikrodisseksjonsprosedyre. En annen type laseropptaksmikrodisseksjonssystem bruker bare en laser for å skille celleprøver. Det er ingen kontakt mellom cellene og noen type materiale, og energien til selve laseren flytter de mikrodissekerte cellene inn i en prøvebeholder. Et annet system fjerner uønskede celler med ultrafiolett lys, som tar lengre tid å fullføre, men som heller ikke krever bruk av en polymerfilm.
På grunn av sin evne til å oppnå rene prøver av celler for molekylær analyse, er mikrofangst av laserfangst blitt forbedret gjennom forskjellige studier og endringer. Det har vist seg at bruk av frossent vev gir bedre resultater. Lim har blitt brukt på mikroskopbilder, men i stedet for å hjelpe til å feste celler, gjør dette det vanskelig å fange spesifikke vevsprøver. Tilstedeværelsen av fuktighet har en negativ innvirkning på å få celler til en film, så dehydrerte vevsseksjoner er å foretrekke under teknikken.
Til tross for fordelene med mikrodisseksjon med laser, har noen få ulemper. Kostnadene for mikroskop, datamaskiner og programvare kan være høye. Det kan også være vanskelig å se prøver fordi det ikke brukes en glideskive for mikroskopdeksel, noe som er et problem med mange lignende teknikker. Forskere synes også at de trenger mer tid til å gjennomføre prosessen, men renheten til prøvene oppnådd med LCM oppveier fortsatt fordelene ved andre metoder.