Hva er en intern standard?

En intern standard er en kjent mengde kjemikalie som tilsettes en analytisk prøve, som lar teknikere kalibrere laboratorieinstrumenter. Dette tillater også beregning av mengder av ukjente kjemikalier, fordi instrumentet vil vise mengden av den kjente standarden som referanse. Tester som kan dra nytte av en intern standard inkluderer gass og væskekromatografi.

Gasskromatografi fører en fordampet prøve gjennom en kolonne fullpakket med en solid, veldig ren form for jord. Prøven føres gjennom kolonnen med en inert, eller ikke-reaktiv, gass som nitrogen eller argon. Ulike molekyler absorberes på kolonnen og blir deretter frigjort basert på deres molekylstruktur. Gassen fører deretter den separerte prøven til en flamme for å danne ioner, eller molekyler med små elektriske ladninger. En detektor bestemmer mengden av hvert ion og plotter resultatene på et diagram.

Flytende kromatografi skiller også prøver i forskjellige molekyler, men bruker et flytende løsningsmiddel for å bevege prøven ved tyngdekraft eller trykk over et stasjonært materiale. Et kromatografisjiktmateriale kan være en harpiks, kiselgur eller til og med en annen væske. Prøven settes på toppen, og løsningsmiddel tilsettes for å skyve prøven ned gjennom kolonnematerialet.

Deler av prøven vil passere gjennom kolonnen i forskjellige hastigheter basert på molekylære eller ioniske egenskaper. Små væskeprøver, kalt alikvoter, blir tatt med jevne mellomrom fra bunnen av kolonnen. Disse prøvene vil inneholde de forskjellige molekylene som har separert seg i kolonnen, og blir analysert for å bestemme deres sammensetning.

I begge typer kromatografi kan mange variabler påvirke resultatene. Strømningshastigheten til bærergassen kan endre seg litt, eller kolonnene kan være ved forskjellige temperaturer for forskjellige prøver. Å legge til en kalibrert intern standard gir et kjent resultat for alle prøver som er plassert i testinstrumentet. Hvis noen variabler i instrumentet, for eksempel gasstrømningshastighet, endres med en liten prosentandel, vil standarden endres med samme mengde.

Når instrumentet er kalibrert ved å kjøre en prøve med den interne standarden, kan en ukjent kjemisk prøve kjøres gjennom det samme instrumentet, inkludert standarden. Resultatene vil vise den kjemiske sammensetningen av det ukjente, pluss den interne standarden, plottet på grafen opprettet av instrumentet. Når man kjenner til mengden intern standard, kan den relative mengden ukjent kjemisk stoff bestemmes, noe som vil tillate en beregning av konsentrasjonen.

Det er viktig å merke seg at en intern standard ikke brukes til å kjemisk reagere med noen prøver. Snarere brukes det til å sammenligne molekyler av ukjent materiale med den kjente mengden av standarden. Denne teknikken er kjent som å sette en variabel, fordi den kjente standarden alltid vil være den samme fra prøve til prøve, uavhengig av andre forhold som kan endre seg.