Hva er antistoffregistrering?
Antistoffdeteksjon er viktig i medisin for å oppdage sykdom, da antistoffer er store proteiner som kan oppdage virus og bakterier. Antistoffdeteksjon utføres i laboratorier og i feltet for å undersøke antistoff- og antigenbindinger og identifisere et antistoff ved sin spesielle fargeendring når et enzymreagerende substratmolekyl er koblet til det mens det fremdeles er bundet til antigenet. Deteksjonstesten er kjent som enzymbundet immunosorbentanalyse (ELISA). Før utviklingen av ELISA var de eneste analysene radioimmunoanalyser som identifiserte antistoffer ved deres spesifikke radioaktivitet på 1960-tallet. På begynnelsen av 1970-tallet ble det utviklet flere ELISA-teknikker for å identifisere spesifikke antistoffer.
Den indirekte Sandwich ELISA-teknikken for antistoffdeteksjon forbereder en bufret løsning som inneholder et sykdomsantigen og binder den til en plastplate. Deretter introduseres et primært antistoff fra en pasient for å binde med antigenet. Deretter introduseres et sekundært antistoff med et tilknyttet enzym og et substrat for enzymet tilsettes. Dette forårsaker en reaksjon som endrer enzyms farge, og signaliserer at de to antistoffene har bundet seg, dersom antistoffet fra pasienten er positivt for det sykdomsantigenet. Styrken til fargeendring betegner mengden sykdom antistoffet har oppdaget; denne fargen styrkes deretter kvantitativt med et spektrometer.
En annen ELISA-teknikk som er god når prøver fra pasienter er rå eller uren, er den konkurrerende ELISA, når et umerket antistoff blir inkubert med pasientens antigenprøve. Det bundne antistoff / antigenkomplekset vaskes slik at det ubundne antistoffet fjernes og et sekundært antistoff koblet med et enzym spesifikt for det primære antistoffet blir introdusert for å binde med antigenet. Ved tilsetning av et substrat til enzymet, vil sykdommen oppdages av antistoffet, vil produsere kromogene eller fluorescerende egenskaper som et signal. En feltprøve som brukes av israelske leger, bruker et prøverør fulle av proteinfragmenter og antistoffer og introduksjon av en blå væske. Hvis den blå væsken blir rød i løpet av ti minutter, blir det spesifikke antigenet i prøverøret gjenkjent av antistoffet for den aktuelle sykdommen.
I vanskelig tilgjengelige områder i utviklingsland er laboratorier ikke lett tilgjengelige. Mange kommersielle antistoffdeteksjonssett er blitt solgt for helsepersonell for å teste for tuberkulose, spesielt pediatrisk og humant immunsviktvirus / autoimmun mangelsyndrom (HIV / AIDS) relatert tuberkulose. En studie som omfattet 68 spesifikke studier, fant at disse settene ikke var så pålitelige som mikroskopi av sputumsmurt.
Malaria er en annen sykdom som antistoffdeteksjon bruker en fluorescerende antistofftestprosedyre. Denne prosedyren er god for screening av blodgivere, fordi transfusjonsindusert malaria kanskje ikke vises ved en enkel blodfilmundersøkelse. Hvis en pasient viser gjentatte blod-negative prøver, men som fremdeles viser sterk symptomologi av sykdommen, kan den fluorescerende markørtesten avsløre den. Ved undersøkelse under mikroskop viser antistoffene mot malaria ofte en eplegrønn farge som er positiv for malariaparasitten.