Hva er antistofffarging?
Antistofffarging er en laboratorieprosedyre som brukes til å farge en prøve for å oppdage tilstedeværelsen av visse antigener i en prøve eller for å fremheve antigener slik at de kan sees tydelig. Det er en rekke forskjellige antistofffargningsprosedyrer som kan brukes, avhengig av prøven og teknikerens preferanse. Denne teknikken undervises på høyskole- og universitetsnivå i mange regioner, og i videregående skoler med avanserte naturfagsprogrammer kan studenter også lære antistofffarging.
Ved antistofffarging introduseres et antistoff til en prøve som skraping eller biopsi. Hvis det er antigener i prøven som antistoffet vil reagere på, låses det fast på dem. Når prøven vaskes, vil overflødige antistoffer vaskes bort, og etterlate antistoffene som låste seg til prøven. Hvis forskeren bruker konjugerte antistoffer med påsatte lysstoffmerker, vil prøven lyse opp under riktig belysning og forråde tilstedeværelsen av antistoffene det gjelder.
I andre tilfeller må folk bruke et sekundært antistoff. Etter å ha vasket prøven, tilsetter de det sekundære antistoffet, et preparat med en fluorescerende tag festet. Det sekundære antistoffet fester seg til de primære antistoffene i prøven, og vil fluoresse under lys som diskutert ovenfor. Fluorescensen kan brukes til diagnostisering av sykdom, ved laboratorieteknikker som kontrollerer prøver for antigener assosiert med spesifikke sykdommer, og den kan også brukes til å lete etter tegn på forurensning og for å identifisere tilstedeværelsen av antigener av andre årsaker.
Ved mikroskopi kan antistofffarging noen ganger være nyttig for å fremheve visse strukturer. Selv med utmerket oppløsning kan mikroskopi noen ganger være vanskelig å se, og det kan være utfordrende å plukke ut skjulte eller små strukturer i bildet. Ved å bruke antistofffarging lar folk lage et flagg for enkelt å identifisere og skissere strukturer av interesse, for eksempel spesielle typer vev eller strukturer inne i celler. Fluorescensen vil bli sett på alle steder på lysbildet der antistoffet av interesse er til stede, og kartlegger strukturer i prøven.
Antistofffarging krever tilgang til laboratorieutstyr, antistoffer og forskjellige løsninger som brukes under prosessen med å fikse og bevare prøver. Det er viktig å utføre prosedyren riktig for å unngå forurensning og feil, som å la løsninger sitte på en prøve for lenge, skjule eller forvirre resultatene. Mange laboratorier har en manual som deres ansatte følger, og når de forbereder materiale til forskning, vil folk beskrive metodene sine i detalj slik at arbeidet kan replikeres.