Hva er kvantitativ fluorescens?

Kvantitativ fluorescens er utstillingen for stråling som sendes ut i en prøve. Ved hjelp av bildeteknologi kan en forsker samle informasjon om prøven og bruke den til å lære mer om dens struktur eller funksjon. Denne tilnærmingen blir ofte brukt i biologi for å studere individuelle celler og hele organismer. Det krever tilgang til et laboratorium som inneholder mikroskopiutstyr og kameraer med passende følsomhet. Eksempler på bilder fra denne formen for analyse kan sees i lærebøker og vitenskapelige artikler, sammen med diskusjoner om innhentede data.

Prøver forberedt for mikroskopavbildning kan farges med lysstoffmerker, som proteiner som fester seg til spesifikke strukturer i cellen. Når disse taggene blir sett gjennom et kamera under riktige forhold, lyser de. Bare å observere belysningen kan gi viktig informasjon for forskeren. For eksempel kan en immunolog som leter etter spor etter et spesifikt antistoff bruke en kode for å identifisere det. Dette er et eksempel på kvalitativ fluorescens, der belysningen gir generell informasjon om prøvens kvaliteter.

I målinger av kvantitativ fluorescens samler forskeren spesifikk, målbar informasjon. Dette kan inkludere data om lysets nøyaktige intensitet. Videre behandling av prøven kan gi muligheter for avanserte bildeteknikker som fluorescerende utvinning etter fotobleking (FRAP), som gir informasjon om bevegelse av strukturer i prøver. Alle disse kvantitative fluorescens-teknikkene kan gi ny innsikt i hva en struktur er, hvordan den fungerer og hva den inneholder.

Presisjonsutstyr er nødvendig for denne typen arbeid. Eventuelle lysstoffrørbehandlinger som legges til et eksemplar, må utarbeides nøye, slik at de merker de ønskede strukturer og ingenting annet. Utstyret må være passende følsomt og kalibrert for å bekrefte at det henter nøyaktig informasjon. Hvis detektoren i et digitalt kamera er slått av, for eksempel, kan det mislykkes i å samle opp fluorescens i noen deler av prøven, eller kan generere en falsk avlesning. I begge tilfeller vil dataene være uriktige.

Patologilaboratorier kan bruke kvantitativ fluorescens for evaluering av noen prøver. Denne teknikken er også mye brukt i forskning. Noen meget slående bilder kan utvikles ved hjelp av lysstoffmerker for å skille ut strukturer som nerver eller spesifikke proteiner. I tillegg til å være visuelt bemerkelsesverdig, kan bildene inneholde et vell av informasjon for forskere som har muligheten til å lese dem. Det er mulig å analysere kvantitative fluorescensbilder med avanserte dataprogrammer for å hente ut mer data og generere meningsfulle resultater.