Hva er total RNA -isolasjon?
Total ribonukleinsyre (RNA) isolasjon er en laboratorieteknikk som brukes til å trekke ut alt det cellulære RNA fra en vevsprøve. Dette skiller seg fra andre prosesseringsmetoder som selektivt trekker frem visse typer RNA. En forsker kan for eksempel ønske å inspisere Messenger RNA (mRNA) og kan fungere med en prøve for å trekke ut bare dette genetiske materialet. Det er en rekke lab -protokoller tilgjengelig for total RNA -isolasjon, ved bruk av en rekke produkter laget av vitenskapelige leverandører.
Det kan være en rekke fordeler med å samle inn alt det cellulære RNA fra en vevsprøve. Det kan gi mer ren og brukbar informasjon. Teknikken kan også tillate forskere å sjekke for nedbrytning som kan forårsake problemer med eksperimenter. Hvis prøven er av dårlig kvalitet, kan forskeren trekke ut RNA igjen for å få en renere og mer nyttig samling av RNA. Dette kan være viktig for mange typer forskning, der dårlig RNA i starten forårsaker problemer med eksperimenter nedover linjen.
Teknikker for total RNA -isolasjon kan involvere en rekke kjemiske midler. Noen fokuserer på bruk av ikke -giftige kjemikalier for å redusere risikoen for skade på prøven. Slike kjemikalier begrenser også nedstrøms forurensning av RNA og er tryggere for laboratoriearbeidere. Labs har en tendens til å velge en spesifikk kjemisk og protokoll som skal anbefale alt personell og inkluderer en detaljert beskrivelse av den totale RNA -isolasjonsprosedyren i manualene deres. Dette sikrer konsistens i RNA -prosessering på anlegget for å gi mer stabile og nyttige resultater.
Prosessen starter med fremstilling av en vevsprøve, som kan variere i størrelse, for å gjøre den klar for behandling som kjemiske reagenser for å trekke frem det totale RNA. Teknikere konsulterer laboratoriet for å finne ut hvordan de skal håndtere prøven og behandle den for å isolere RNA. De kan bruke verktøy som elektroforeseplater for å sjekke kvaliteten på prøven, på jakt etter tegn på nedbrytningion som kan indikere et problem med den totale RNA -isolasjonsprosessen.
Forskere kan utføre sin egen totale RNA -isolasjon eller delegere denne oppgaven til en laboratorieassistent, doktorgradsstudent eller lignende laboratorium. Det er også mulig å kontrakt om isolasjon til andre laboratoriefasiliteter. Noen ganger kan dette være nødvendig for å beskytte integriteten til et eksperiment ved å bruke en tredjepart for å generere verifiserbare og repeterbare resultater. I noen vitenskapelige artikler basert på forskning med det isolerte RNA, må forskeren diskutere metoden som ble brukt for isolasjon, og som utførte arbeidet.