Jak działa bakteryjne testowanie endotoksyny?
Testowanie endotoksyny bakteryjne zwykle obejmuje stosowanie odczynników, które po zmieszaniu w roztworze z możliwym zanieczyszczeniem powodują reakcję, co oznacza obecność endotoksyny. Testy chromogenne, test skrzepu żelowego i testy turbidymetryczne są metodami, których naukowcy zwykle stosują do testowania endotoksyny bakteryjnej. Technicy stosują te metody oceny w różnych substancjach i obiektach podczas sprawdzania zanieczyszczenia endotoksyny. Woda, surowce stosowane w tworzeniu leków, sprzętu i opakowania muszą przekazać standardy endotoksyny.
Bakterie, grzyby i wirusy mają ochronne błony zewnętrzne składające się z lipopolisacharydów, zwane również LPS. Część lipidowa tych łańcuchów zawiera endotoksyny. Substancje te zazwyczaj pozostają w błonie, ale są uwalniane podczas procesu podziału komórek i podczas zniszczenia lub lizy komórkowej. U ludzi substancje te powodują gorączkę, nienormalną krzepnięcie, wstrząs septyczny i inny objawOMS Chociaż w przeciwieństwie do egzotoksyn w komórce, endotoksyny nie przekształcają się w toksoid. Zasadniczo mikrobiolodzy sprawdzają obecność endotoksyn związanych z różnymi bakteriami Gram-ujemnymi, w tym e. coli .
Test skrzepu żelowego lub test lizatu ameboecyte limulus (LAL) obejmuje stosowanie chemikaliów zniszczonych przez błonę, wynikającą z amebocytów kraba podkowego, również określane jako Lyse-limulus polphemus. techniki zaobserwowane pozytywne ozdoby endotoksów lub grzbiet, gdy limulus wyposażony jest w limie. przedmiot lub substancja. Mikrobiolodzy zazwyczaj stosują tę metodę testowania endotoksyny bakteryjnej w połączeniu z badaniami chromogennymi i turbidymetrycznymi dla rozstrzygających wyników.
Testowanie endotoksyny chromogennej bakteryjnej wykorzystuje specjalnie leczony LAL. Kiedy ta lizate kontaktuje się z endotoksyną, reakcja wytwarza określony kolor. Ostateczny proces testowania obejmuje pomiar zmętnienia lub zachmurzenia rozwiązania. Technicy narażają roztwór utworzony w teście skrzepu żelowego na spektrofotometr, który emituje wiązkę światła. Mierząc utratę intensywności światła w wiązce, która przechodzi przez roztwór, mikrobiolodzy mogą ustalić, czy endotoksyna jest obecna.
Associates ogólnie uzupełniają te trzy bakteryjne testy endotoksyny dwa lub trzy razy w celu zapewnienia dokładnych wyników. Test żelowy nie jest stosowany wyłącznie, ponieważ jego najniższa granica wykrywania wynosi 0,03 jednostki Ehrlich na mililitr (UE/ml). Testowanie chromogenne i turbidymetryczne wykrywają endotoksyny w zakresie 0,005 UE/ML. Parametry bezpieczeństwa różnią się znacznie w zależności od testowanej substancji. Podczas gdy sterylna woda stosowana do celów wtrysku lub nawadniania może zawierać nie więcej niż 0,25 UE/ml, sterylna woda do celów inhalacyjnych może zawierać do 0,5 UE/ml.