Co to jest antybiogram?
Test antybiogramu można wykorzystać do dwóch różnych celów. Metoda Kirby-Bauera służy do testowania podatności szczepu bakteryjnego na różne antybiotyki. Antybiogramy mogą również określać minimalne stężenie hamujące (MIC) lub najmniejsze stężenie antybiotyku, które będzie hamować wzrost szczepu bakteryjnego, przy użyciu metody rozcieńczania.
Metoda Kirby-Bauer jest antybiogramem stosowanym do określenia najlepszego antybiotyku, który można zastosować przeciwko konkretnemu szczepowi bakteryjnemu. Testy przeprowadza się na płytkach Petriego, które są płytkimi, okrągłymi, przykrytymi naczyniami wypełnionymi podłożem agarowym lub substancją żelopodobną nasyconą substancjami odżywczymi w celu pobudzenia wzrostu bakterii. Badany szczep bakteryjny rozkłada się równomiernie na powierzchni płytki. Kilka okrągłych papierowych krążków, z których każdy jest nasycony innym antybiotykiem, jest równomiernie rozmieszczonych na powierzchni płytki i delikatnie wciskanych w agar, aby zetknąć się z bakteriami. Następnie płytki hodowano przez noc w inkubatorze.
Po całonocnej inkubacji okrągły krążek pozbawiony wzrostu bakterii otoczy każdy krążek papierowy. Obszar ten nazywa się strefą hamowania. Średnicę strefy hamowania dla każdego krążka mierzy się i porównuje z tabelą kontrolną w celu ustalenia, czy badany szczep bakteryjny jest oporny, pośredni lub podatny na każdy z różnych antybiotyków. Duża strefa hamowania oznaczałaby, że szczep bakteryjny jest wrażliwy na antybiotyk na krążku testowym.
Metoda rozcieńczania jest antybiogramem stosowanym do określenia najbardziej skutecznego stężenia antybiotyku, które można zastosować przeciwko szczepowi bakterii. Zaczyna się od hodowania lub hodowania świeżej partii testowej bakterii przez noc, a następnie sprawdzania czystości nowych kultur lub oczyszczania kultury. Przygotowano również dwie bakterie kontrolne lub porównawcze. Stężenie szczepu bakteryjnego określa się za pomocą spektrofotometru, a stężenie dostosowuje się do zakresu odpowiedniego dla metody rozcieńczania.
Przygotowuje się seryjne rozcieńczenie badanych antybiotyków, dokonując rosnących i stopniowanych zmian stężenia w różnych fiolkach. Jedną serię różnych stężeń antybiotyku zaszczepia się równymi ilościami badanego szczepu bakteryjnego, a drugą serię zaszczepia się kontrolnymi szczepami bakteryjnymi. Wszystkie zaszczepione stężenia antybiotyku mogą rosnąć przez noc w inkubatorze lub do momentu zaobserwowania widocznego wzrostu bakterii w niektórych fiolkach. MIC to stężenie antybiotyku, w którym nie obserwuje się widocznego wzrostu bakterii. Wartość MIC to kontrolowany sposób oceny zmieniającej się oporności szczepów bakteryjnych i wyznacza granice antybiotykoterapii w przypadku infekcji.