Co to jest barwienie różnicowe?
Mimo że mikroby lub komórki zwierzęce mogą być widoczne pod mikroskopem, poszczególne części maleńkiej komórki mogą być trudne do odróżnienia, ponieważ kolory pod mikroskopem mogą wyglądać podobnie lub komórka może być przezroczysta. Analitycy laboratoryjni specjalizujący się w analizie mikroskopowej komórek wykorzystują metody barwienia, aby nadać komórce kolory, dzięki czemu mogą dobrze widzieć części. Barwienie różnicowe odnosi się do rodzaju barwienia, które pozwala analitykowi odróżnić różne typy komórek od siebie; jest to ogólny termin obejmujący różne procedury barwienia.
Kiedy zwierzę rozkłada się na swoje komórki, komórki mogą różnić się wyglądem i działaniem. Zwykle różne gatunki mają zestawy komórek, które wydają się osobno pod mikroskopem. Typowym przykładem odmienności między gatunkami i grupami jest sposób, w jaki większość bakterii można podzielić na dwie grupy na podstawie ich reakcji na określony rodzaj plamy zwanej barwieniem Gram. Hans Christian Gram był duńskim mikrobiologiem, który po raz pierwszy wynalazł plamę w 1844 r., Która wciąż jest powszechnie stosowana jako przydatny pierwszy etap identyfikacji bakterii w warunkach laboratoryjnych.
W barwieniu różnicowym próbkę populacji bakteryjnej traktuje się zestawami barwników w procesie, który obejmuje etapy takie jak podgrzewanie i mycie próbek, aby barwnik dostał się do wszystkich komórek. Różne etapy wykorzystują barwniki, takie jak fiolet krystaliczny i fuksyna, a także inne substancje, takie jak alkohol i jod, aby poprawić kolor. Komórki, które wydają się różowe, są identyfikowane jako Gramujemne, podczas gdy komórki w kolorze niebieskim pod koniec procesu są Gram dodatnie. Ta różnica kolorów pomaga mikrobiologowi w określeniu rodzaju ściany komórkowej gatunku, co pomaga zawęzić listę gatunków, do których należy nieznana próbka. Oprócz wskazania rodzaju Grama proces barwienia różnicowego sprawia, że kształty i rozmieszczenie komórek są bardziej oczywiste, co również pomaga w identyfikacji.
Komórki zwierzęce można również sortować pod mikroskopem za pomocą barwienia różnicowego. Na przykład komórki krążące we krwi reagują inaczej na niektóre plamy. Przykładem jest barwnik Wrighta, który zawiera barwniki takie jak eozyna i błękit metylenowy i który może powiedzieć analitykowi laboratoryjnemu, jakie rodzaje komórek krwi są obecne w próbce i w jakim stężeniu. Na przykład, komórka eozynofilowa ma tendencję do przyjmowania dużo zabarwienia eozynowego w porównaniu do innych komórek krwi. Analitycy zazwyczaj używają zabarwienia plam zidentyfikowanego poprzez barwienie różnicowe wraz z innymi cechami komórek, takimi jak rozmiar, kształt i struktury wewnętrzne, aby dowiedzieć się, które komórki są w próbce.