Co to jest test wiązania dopełniacza?
Test wiązania dopełniacza jest immunologicznym testem medycznym, który wykrywa specyficzne przeciwciała we krwi osoby. Ten test był kiedyś używany jako środek do diagnozowania chorób zakaźnych, ale obecnie częściej stosuje się reakcję łańcuchową polimerazy i inne metody wykrywania DNA. Wartość testu wiązania dopełniacza polega teraz na jego zdolności do diagnozowania zaburzeń autoimmunologicznych lub monitorowania niektórych stanów przewlekłych.
Białka dopełniacza to białka biorące udział w reakcji immunologicznej zwanej kaskadą dopełniacza. Ta reakcja zachodzi w obecności patogenów bakteryjnych i powoduje pokrycie tych patogenów białkami, które pozwalają komórkom odpornościowym na połknięcie i zniszczenie bakterii. Proces ten, zwany opsonizacją, wymaga obecności przeciwciał swoistych dla białek na powierzchni bakterii. Białka w kaskadzie dopełniacza mogą również bezpośrednio zabijać, pokrywając bakterie cząsteczkami, które powodują ich pękanie, co może się zdarzyć przy braku specyficznych przeciwciał.
Lekarz czasami zleca test wiązania dopełniacza pacjentowi, który doświadcza powtarzających się infekcji. Próbka testowa to niewielka ilość krwi, zazwyczaj pobierana z żyły ramiennej, bez specjalnego przygotowania dla pacjenta. Po pobraniu próbki przetwarza się ją w celu oddzielenia płynnej surowicy od krwi, której pozwolono na koagulację. Następnie przeprowadza się test wiązania dopełniacza na surowicy.
Przed wykonaniem testu konieczne jest dodatkowe przetwarzanie, aby zniszczyć własne białka dopełniacza pacjenta. Jest to konieczne, ponieważ test wiązania dopełniacza mierzy szybkość, z jaką przeciwciała pacjenta reagują na dopełniacz, a stężenia dopełniacza i poziomy aktywności różnią się w zależności od osoby. Aby osiągnąć ustandaryzowane wyniki, dopełniacz pacjenta jest niszczony, a zamiast tego stosuje się próbkę dopełniacza o znanym stężeniu i poziomie aktywności.
Na tym etapie próbka dopełniacza jest następnie gotowa do testowania, a badany antygen jest dodawany do próbki. Antygen jest specyficzny dla określonego gatunku patogenu lub dla przeciwciał autoimmunologicznych. Następnie do próbki surowicy dodaje się czerwone krwinki owiec, związane z przeciwciałami swoistymi dla komórek.
Jeśli próbka zawiera przeciwciała swoiste dla testowanego antygenu, wówczas przeciwciała będą reagować z dodanym dopełniaczem. Spowoduje to, że cały dopełniacz w próbce zostanie zużyty, a próbka nie będzie reagować z komórkami owiec; jednakże, jeśli specyficzne przeciwciała nie są obecne, dopełniacz nie zostanie wykorzystany. W takim przypadku dopełniacz spowoduje rozerwanie czerwonych krwinek owiec, zabarwiając próbkę na różowo. Dlatego jeśli próbka zmieni kolor na różowy, jest to wynik ujemny, a jeśli próbka pozostaje czysta, jest to wynik dodatni.
Dodatkowym zastosowaniem tego testu jest monitorowanie osoby, która ma znaną chorobę autoimmunologiczną. W takim przypadku testowanie poziomów aktywności dopełniacza swoistej dla antygenu może być dobrym sposobem pomiaru skuteczności określonego leczenia. Jest to często przeprowadzane dla osób z toczniem rumieniowatym układowym (SLE), chorobą autoimmunologiczną, która rozwija się, gdy układ odpornościowy organizmu reaguje na białka w jądrach komórkowych. Test wiązania dopełniacza jest również przydatny do diagnozowania infekcji ośrodkowego układu nerwowego, ponieważ test nie wymaga próbki płynu mózgowo-rdzeniowego, co jest znacznie trudniejsze do uzyskania.