Co to są przeciwciała fosfo?
Fosforylacja białek polega na dodaniu grupy fosforanowej (PO4) do określonego białka, zwykle na reszcie seryny, treoniny lub tyrozyny. Ogólnie fosforylacja białek jest jednym z głównych sposobów regulowania transdukcji sygnału i aktywności enzymatycznej w komórkach. Przeciwciała wykrywające te fosforylowane miejsca białkowe nazywane są przeciwciałami fosfo. Zdolność do wykrywania fosforylowanej pozostałości białka w określonym miejscu jest cennym narzędziem do wykrywania aktywności szlaków sygnałowych w komórce i jest kluczem do zrozumienia wielu komórkowych procesów sygnalizacyjnych.
Dodanie grupy fosforanowej do reszty seryny, treoniny lub tyrozyny może spowodować aktywację lub inaktywację białka poprzez indukcję zmiany konformacyjnej białka lub wpływ na interakcje białka z innymi białkami lub cząsteczkami. Fosforylacja odgrywa znaczącą rolę w wielu ważnych procesach sygnalizacji komórkowej, w tym we wzroście i śmierci komórek, szlakach, które indukują lub hamują powstawanie nowotworów, hormonalne procesy sygnalizacyjne i wytwarzanie energii. Białka są fosforylowane przez enzymy zwane kinazami, a defosforylowane przez enzymy zwane fosfatazami. Proces odwracalnej fosforylacji umożliwia zatem komórce ścisłą kontrolę nad tymi ważnymi szlakami sygnałowymi.
Przeciwciała to cząsteczki w kształcie litery Y, które zawierają miejsca wiążące antygen na końcu każdego ramienia Y. Ogólnie, przeciwciała rozpoznają unikalne sekwencje w odpowiadających im antygenach, które są nazywane epitopami. Wytwarzanie przeciwciał zachodzi naturalnie jako część odpowiedzi immunologicznej, gdy gospodarz jest narażony na obce ciało, co pozwala na specyficzne rozpoznanie i neutralizację tych obcych antygenów. Ten naturalny proces może zostać wykorzystany do celów badawczych poprzez wytworzenie przeciwciał, które będą specyficznie wykrywać antygen lub białko będące przedmiotem zainteresowania. Podczas generowania przeciwciał badawczych gatunkami żywicielskimi są często króliki, myszy, owce lub kozy, ale badacze mogą również wykorzystywać komórki odpornościowe w hodowli do generowania przeciwciał przeciw interesującemu antygenowi.
Przeciwciała fosfo można stosować zarówno w badaniach, jak i zastosowaniach klinicznych. W warunkach klinicznych wykrycie określonego fosforylowanego białka przez przeciwciało fosfo w próbce guza może pomóc w ocenie stopnia guza, a nawet w przewidywaniu wyniku choroby. W warunkach badawczych przeciwciała fosfo są często stosowane do badania aktywacji szlaków sygnałowych komórek w odpowiedzi na określony bodziec.
Wiele firm produkujących przeciwciała jest w stanie dostarczyć przeciwciała fosfo naukowcom i klinicystom. Naukowcy mogą wybrać te przeciwciała z katalogu przeciwciał, który często zawiera odczynniki dla setek różnych fosforylowanych białek. Ponadto kilku dostawców przeciwciał oferuje produkcję niestandardowych przeciwciał dla rzadko badanych fosforylowanych białek, dla których komercyjne przeciwciało fosfo nie jest dostępne.