Co to jest odczynnik do transfekcji?
Odczynnik do transfekcji jest nośnikiem DNA, którego naukowiec może użyć do wstawienia DNA do komórek w hodowli. Wiele rodzajów odczynników jest dostępnych za pośrednictwem firm z branży nauk przyrodniczych, a badacze mogą również opracować własne dla niestandardowych aplikacji. Cząsteczki te mogą działać na wiele różnych sposobów, przenosząc DNA do komórek docelowych i wstawiając je do genomu. Typowy proces obejmuje zmieszanie pożądanego DNA z odczynnikiem, dodanie go do komórek w hodowli, inkubowanie ich, a następnie przesiewanie w celu sprawdzenia, które zawierają nowe DNA.
Transfekcja DNA jest bardzo ważnym narzędziem badawczym. Badacze mogą wstawiać materiał genetyczny w celu włączenia lub wyciszenia genów i mogą zastosować transfekcję, aby zmusić komórki w hodowli do działania w określony sposób. Celem może być przejściowa ekspresja genetyczna na potrzeby badań. Może to być również trwała modyfikacja, która pozwoli badaczowi stworzyć kolonię sklonowanych komórek, z których wszystkie wyrażają ten sam gen. Komórki te można wykorzystać w badaniach i mogą mieć zastosowania terapeutyczne.
Fosforan wapnia jest jednym z najstarszych odczynników do transfekcji. Naukowcy używają również materiałów na bazie lipidów, które wydają się być bardzo skuteczne. Mogą również wykorzystywać wirusowe wektory DNA, a także metody mechaniczne, takie jak mikroiniekcja, w której pożądany DNA jest wstrzykiwany bezpośrednio, aby zmniejszyć ryzyko degradacji materiału. Pistolety genowe to kolejne popularne narzędzie do transfekcji DNA.
Kiedy naukowiec wybiera odczynnik do transfekcji, należy wziąć pod uwagę kilka czynników. Obejmują one sposób użycia odczynnika, jakiego rodzaju DNA jest zaangażowane i jakiego rodzaju efektów chce badacz. Odczynnik do transfekcji nie zawsze jest całkowicie niezawodny, a naukowiec potrzebuje również dobrego narzędzia do badania, aby znaleźć i wyizolować pomyślnie transfekowane komórki. Pozwoli to naukowcom odrzucić komórki, które nie zaakceptowały nowego materiału genetycznego wraz z komórkami, które to zrobiły, ale wyrażą go w nietypowy sposób, co sugeruje, że mogła nastąpić degradacja DNA.
Listy odczynników do transfekcji DNA są dostępne w firmach z branży nauk biologicznych. Większość ma tabelę, która pomaga badaczom zdecydować, którego użyć, na podstawie typu komórki i jakiego rodzaju materiału genetycznego chce wstawić badacz. Naukowcy zazwyczaj mogą poprosić o próbki, aby umożliwić im przetestowanie odczynnika przed rozpoczęciem jego stosowania w badaniach. Ważne jest uważne przeczytanie dokumentacji, aby upewnić się, że działanie odczynnika do transfekcji jest w pełni zrozumiałe przed użyciem.