Co to jest wykrywanie przeciwciał?
Wykrywanie przeciwciał jest ważne w medycynie do wykrywania chorób, ponieważ przeciwciała są dużymi białkami, które mogą wykrywać wirusy i bakterie. Wykrywanie przeciwciał jest przeprowadzane w laboratoriach i na polu w celu zbadania wiązania przeciwciała i antygenu oraz identyfikacji przeciwciała na podstawie jego konkretnej zmiany koloru, gdy cząsteczka substratu reagująca na enzym jest z nim połączona, gdy jest nadal związana z antygenem. Test wykrywający jest znany jako test immunoenzymatyczny (ELISA). Przed opracowaniem testu ELISA jedynymi testami były testy radioimmunologiczne, w których w latach 60. XX wieku zidentyfikowano przeciwciała na podstawie ich specyficznej radioaktywności. Na początku lat 70. XX wieku opracowano kilka technik ELISA do identyfikacji swoistych przeciwciał.
Technika wykrywania przeciwciał metodą pośredniego testu Sandwich ELISA przygotowuje buforowany roztwór zawierający antygen chorobowy i wiąże go z plastikową płytką. Następnie wprowadza się pierwotne przeciwciało od pacjenta w celu związania z antygenem. Następnie wprowadza się drugie przeciwciało z dołączonym enzymem i dodaje substrat dla enzymu. Powoduje to reakcję, która zmienia kolor enzymu, sygnalizując, że dwa przeciwciała się połączyły, jeśli przeciwciało od pacjenta jest dodatnie dla tego antygenu choroby. Siła zmiany koloru oznacza liczbę chorób wykrytych przez przeciwciało; tę siłę koloru mierzy się następnie ilościowo za pomocą spektrometru.
Inną techniką ELISA dobrą, gdy próbki od pacjentów są surowe lub nieczyste, jest kompetycyjny test ELISA, gdy nieznakowane przeciwciało inkubuje się z próbką antygenu pacjenta. Związany kompleks przeciwciało / antygen przemywa się tak, że niezwiązane przeciwciało usuwa się i wprowadza się przeciwciało wtórne sprzężone z enzymem swoistym dla przeciwciała pierwotnego w celu związania z antygenem. Po dodaniu substratu do enzymu, jeśli choroba zostanie wykryta przez przeciwciało, enzym wytworzy sygnał chromogenny lub fluorescencyjny jako sygnał. Test polowy stosowany przez izraelskich lekarzy wykorzystuje probówkę pełną fragmentów białka i przeciwciał oraz wprowadzenie niebieskiej cieczy. Jeśli niebieska ciecz zmieni kolor na czerwony w ciągu dziesięciu minut, dany antygen w probówce jest rozpoznawany przez przeciwciało dla tej konkretnej choroby.
W trudno dostępnych obszarach krajów rozwijających się laboratoria nie są łatwo dostępne. Wiele komercyjnych zestawów do wykrywania przeciwciał zostało sprzedanych pracownikom służby zdrowia w celu przetestowania gruźlicy, w szczególności w przypadku gruźlicy związanej z wirusem niedoboru odporności u dzieci i młodzieży / zespołem niedoboru autoimmunologicznego (HIV / AIDS). W jednym badaniu obejmującym 68 badań szczególnych stwierdzono, że zestawy te nie były tak niezawodne jak mikroskopia rozmazu plwociny.
Malaria to kolejna choroba, w przypadku której wykrywanie przeciwciał wykorzystuje procedurę testu na przeciwciała fluorescencyjne. Ta procedura jest dobra do badań przesiewowych dawców krwi, ponieważ malaria wywołana transfuzją może nie zostać wykazana podczas prostego badania filmu krwi. Jeśli pacjent pokazuje powtarzające się próbki krwi ujemne, ale wykazuje silną symptomologię choroby, fluorescencyjny test markerowy może to wykryć. Podczas badania pod mikroskopem przeciwciała przeciwko malarii często wykazują kolor jabłkowo-zielony, który jest dodatni dla pasożyta malarii.