Co to jest Western blot?
Western blot to technika analizy laboratoryjnej, która służy do izolowania białek. Może być stosowany w diagnozie niektórych chorób, a także w badaniach różnych białek i procesów. Słynnie, Western blot jest powiązany z rozpoznaniem zakażenia HIV, ale można go również wykorzystać do poszukiwania śladów bydlęcej gąbczastego zapalenia mózgu (BSE) i boreliozy. Próbki wysłane do testowania z protokołem Western blot mogą zwrócić wyniki w ciągu kilku dni do kilku tygodni, w zależności od pojemności laboratoryjnej i pilności.
W Western blot próbkę, która może pochodzić z krwi lub tkanki, najpierw przekłada się przez elektroforeza, aby białka będą się rozdzielić długością. Pasek żelu elektroforezy z izolowanymi białkami o długości docelowej można zastosować do przeniesienia białek do substratu nitrocelulozy na następny etap testu. Na tym etapie do próbki wprowadza się przeciwciało, w którym cel polegający na oznaczeniu białek antygenami, które zablokowuje przeciwciałon do.
Po oznaczeniu białek można je łatwo zidentyfikować. W przypadku testowania choroby obecność białka reaktywnego wskazuje, że próbka była pozytywna. Western blot rzadko zwracają fałszywe pozytywne pozycje, chociaż może się to zdarzyć, a mogą również zwrócić fałszywe negatywy, w których dana osoba faktycznie ma chorobę, ale nie pokazuje testów Western blot. Może to być szczególnie powszechne w przypadkach, w których środek powodujący chorobę nie zaczął jeszcze powtórzyć.
Naukowcy mogą wykorzystać wyniki do zidentyfikowania określonych białek, które śledzą, i dla różnych innych celów. Zrozumienie, w jaki sposób funkcje protokołu Western blot jest ważną umiejętnością dla niektórych badaczy i techników laboratoryjnych, ponieważ muszą być w stanie zwrócić wiarygodne i niezawodne wyniki przy użyciu tej metody. Umiejętności laboratoryjne, w tym nauka radzenia sobie z skomplikowanymi lub BPróbki AD i jak uniknąć zanieczyszczenia podczas procesu, aby wyniki testu były prawdziwe.
Ta technika jest czasem znana jako immunoblot, ponieważ zasadniczo pożądane białka są „zaklejące” przeciwciałami, aby się pojawiły. Test ten można wykorzystać do poszukiwania białek u wszystkich zwierząt, nie tylko ludzi, z weterynacjami często korzystającymi z testu Western blot w celu ustalenia, czy stado krów zostało zarażone lub narażone na BSE.