Co to jest całkowita izolacja RNA?
Izolacja całkowitego kwasu rybonukleinowego (RNA) jest techniką laboratoryjną stosowaną do ekstrakcji całego RNA komórkowego z próbki tkanki. Różni się to od innych metod przetwarzania, które selektywnie wyciągają niektóre typy RNA. Na przykład badacz może chcieć sprawdzić RNA Messenger (mRNA) i może pracować z próbką w celu wydobycia tego materiału genetycznego. Istnieje wiele protokołów laboratoryjnych do całkowitej izolacji RNA, z wykorzystaniem różnych produktów wykonanych przez dostawców naukowych.
Może być wiele zalet zebrania całego RNA komórkowego z próbki tkanki. Może to dostarczyć bardziej czyste i użyteczne informacje. Technika może również pozwolić badaczom sprawdzić degradację, która może powodować problemy z eksperymentami. Jeśli próbka jest słabej jakości, badacz może ponownie wydobyć RNA, aby uzyskać czystszy i bardziej przydatny zbiór RNA. Może to być ważne dla wielu rodzajów badań, w których słaby RNA na początku powoduje problemy z eksperymentami w dół.
Techniki całkowitej izolacji RNA mogą obejmować różne środki chemiczne. Niektórzy koncentrują się na stosowaniu nietoksycznych chemikaliów w celu zmniejszenia ryzyka uszkodzenia próbki. Takie chemikalia ograniczają również zanieczyszczenie RNA poniżej i są bezpieczniejsze dla pracowników laboratoryjnych. Laboratoria mają tendencję do wybierania konkretnego chemikalia i protokołu, aby zalecić wszystkim personelowi i zawierać szczegółowy opis całkowitej procedury izolacji RNA w swoich instrukcjach. Zapewnia to spójność w przetwarzaniu RNA w obiekcie, aby uzyskać bardziej stabilne i przydatne wyniki.
Proces rozpoczyna się od przygotowania próbki tkanki, która może się różnić, aby przygotować ją do leczenia, które odczynniki chemiczne do wyciągnięcia całkowitego RNA. Technicy konsultują się z instrukcją laboratorium, aby ustalić, jak poradzić sobie z próbką i leczyć ją w celu odizolowania RNA. Mogą używać narzędzi takich jak płytki elektroforezy, aby sprawdzić jakość próbki, szukając oznak degradacjijon, który może wskazywać na problem z całkowitym procesem izolacji RNA.
Naukowcy mogą przeprowadzić własną całkowitą izolację RNA lub przekazać to zadanie asystentowi laboratoryjnemu, absolwentowi lub podobnego pracownika laboratoryjnego. Możliwe jest również zwalczanie izolacji do innych obiektów laboratoryjnych. Czasami może to być konieczne w celu ochrony integralności eksperymentu, wykorzystując stronę trzecią do wygenerowania weryfikowalnych i powtarzalnych wyników. W dowolnych artykułach naukowych opartych na badaniach z izolowanym RNA, badacz musi omówić metodę zastosowaną do izolacji i który wykonał pracę.